某科研單位欲研究神經(jīng)調(diào)節(jié)因素對(duì)大鼠腦缺血損傷后的神經(jīng)保護(hù)作用，選用大腦動(dòng)脈閉塞大鼠模型為實(shí)驗(yàn)材料，分別在不同缺血時(shí)間下對(duì)皮質(zhì)區(qū)細(xì)胞凋亡指數(shù)進(jìn)行測(cè)量，實(shí)驗(yàn)組注射適量使用0.1mol?L-1的PBS緩沖液溶解的人神經(jīng)調(diào)節(jié)素溶液，結(jié)果如圖所示。回答下列問(wèn)題：
（1）由題意可知，實(shí)驗(yàn)的自變量為
缺血時(shí)間和是否使用神經(jīng)調(diào)節(jié)素
缺血時(shí)間和是否使用神經(jīng)調(diào)節(jié)素
。
（2）該科研單位欲在缺血時(shí)間為1.5h的條件下，以0.5%為實(shí)驗(yàn)濃度梯度，研究濃度為1%～3%的神經(jīng)調(diào)節(jié)素的實(shí)驗(yàn)效果。補(bǔ)充完整下列實(shí)驗(yàn)步驟：
①取若干同型號(hào)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，均分為 6
6
組，并編號(hào)。
②在細(xì)胞培養(yǎng)瓶中加入等量的大腦動(dòng)脈閉塞大鼠的神經(jīng)中樞皮質(zhì)區(qū)細(xì)胞，然后依次在實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞培養(yǎng)瓶中分別加入 濃度依次為1%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%的等體積的使用0.1mol?L的PES緩沖液溶解的人神經(jīng)調(diào)節(jié)素溶液
濃度依次為1%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%的等體積的使用0.1mol?L的PES緩沖液溶解的人神經(jīng)調(diào)節(jié)素溶液
，對(duì)照組試管中加入 等體積的0.1mol?L-1的PBS緩沖液
等體積的0.1mol?L-1的PBS緩沖液
。
③培養(yǎng)一段時(shí)間后，檢測(cè)并計(jì)算各組試管中 皮質(zhì)區(qū)細(xì)胞的凋亡指數(shù)
皮質(zhì)區(qū)細(xì)胞的凋亡指數(shù)
，并取平均值，結(jié)果如表：
| 濃度 |
1% |
1.5% |
2.0% |
25% |
3.0% |
| 皮質(zhì)量區(qū)細(xì)胞凋亡指數(shù) |
5.78 |
4.80 |
5.71 |
5.31 |
6.52 |
（3）為進(jìn)一步探究1.5%的人神經(jīng)調(diào)節(jié)素是否為最適濃度，請(qǐng)寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)思路：
在1%～2%濃度范圍內(nèi)設(shè)置更小濃度梯度的多個(gè)實(shí)驗(yàn)組，在缺血時(shí)間為1.5h的條件下，記錄結(jié)果并分析大腦動(dòng)脈閉塞大鼠的皮質(zhì)區(qū)細(xì)胞凋亡指數(shù)
在1%～2%濃度范圍內(nèi)設(shè)置更小濃度梯度的多個(gè)實(shí)驗(yàn)組，在缺血時(shí)間為1.5h的條件下，記錄結(jié)果并分析大腦動(dòng)脈閉塞大鼠的皮質(zhì)區(qū)細(xì)胞凋亡指數(shù)
。
