噬菌體展示技術是將外源蛋白基因插入到噬菌體的適當置，使外源蛋白最終展示引子代噬菌體表面的技術。為臨床檢測腫瘤壞死因子（TNFα，由巨噬細胞分泌的一種蛋白質），利用“噬菌體展示技術”獲得TNFα抗體的部分過程如圖所示，其中a、b、c均為噬菌體。請分析并回答下列相關問題：（1）獲取TNFα抗體的基因時，可從康復者的漿細胞中提取總RNA，加入 逆轉錄逆轉錄酶獲得cDNA，利用抗體的VH和VL設計引物，以雙鏈cDNA為模板，PCR得到抗體可變區(qū)基因序列。擴增該段時，還需加入 TaqTaq酶，若要將具復制15次，則共需要引物 216-2216-2個。
（2）噬菌體結構包括DNA和衣殼蛋白。獲得的TNFα抗體基因需插入到噬菌體的 衣殼蛋白基因衣殼蛋白基因之后，使表達的抗體以融合蛋白的形式展示在噬菌體表面。
（3）篩選過程中，噬菌體與目標分子經(jīng)一定時間孵育，圖中噬菌體 cc（填字母）即為成功轉入TNFα抗體基因的噬菌體。將其洗脫后侵染大腸桿菌增殖，可得到大量TNFα抗體。在其感染大腸桿菌時，不需要不需要（“需要”或“不需要”）制備大腸桿菌感受態(tài)細胞，原因是 因為該噬菌體可以侵染到大腸桿菌因為該噬菌體可以侵染到大腸桿菌。
（4）上述過程獲得的TNFα抗體與康復者體內的不完全相同，原因是大腸桿菌 是原核生物，不含內質網(wǎng)和高爾基體，不能對分泌蛋白進行加工是原核生物，不含內質網(wǎng)和高爾基體，不能對分泌蛋白進行加工。
（5）關于噬菌體展示技術的敘述，正確的是 ABCABC。
A．噬菌體簡單的結構組成將內部基因與表達在外部的蛋白質建立聯(lián)系
B．篩選的高效性和特異性，使挑選到高親和力的抗體成為可能
C．所挑選到的微量存在的噬菌體可通過感染大腸桿菌得到富集擴大
D．與單克隆抗體技術相比，其產量較低，無法大量制備
【考點】噬菌體侵染細菌實驗．
【答案】逆轉錄；Taq；216-2；衣殼蛋白基因；c；不需要；因為該噬菌體可以侵染到大腸桿菌；是原核生物，不含內質網(wǎng)和高爾基體，不能對分泌蛋白進行加工；ABC
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：17引用：1難度：0.7
相似題
-
1．噬菌體侵染細菌的實驗中，對噬菌體蛋白質合成的正確敘述是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/1 8:0:2組卷：4引用：1難度：0.9 -
2．如圖是著名的噬菌體侵染細菌的實驗和肺炎雙球菌轉化實驗的部分步驟：
（1）赫爾希和蔡斯采用的實驗方法是，該實驗能否用15N來標記，為什么？．
（2）若要大量制備32P標記的噬菌體，需先用含32P的培養(yǎng)基培養(yǎng)，再用噬菌體去感染它．T2噬菌體DNA復制的場所是．
（3）從圖中所示結果分析，該實驗標記的是（DNA還是蛋白質），當接種噬菌體后培養(yǎng)時間過長，會發(fā)現(xiàn)上清液中的放射性升高，最可能的原因是復制增殖后的噬菌體．
（4）如圖的“肺炎雙球菌轉化實驗”得出的結論是．加熱殺死的S型菌中的DNA仍有活性的原因可能是．發(fā)布：2025/1/3 8:0:1組卷：13引用：1難度：0.5 -
3．圖1為某同學重復了探究生物遺傳物質的“T2噬菌體侵染大腸桿菌實驗”（甲、乙）和圖2“肺炎雙球菌轉化實驗”．
據(jù)圖回答下列問題：
（1）圖甲中T2噬菌體DNA復制的場所是．
（2）圖乙中若用含32P的噬菌體侵染大腸桿菌，經(jīng)過離心，上清液也有很低的放射性，原因可能是．若改用14C、3H、15N等標記噬菌體而細菌未標記，在子代噬菌體中，中能找到標記元素．
（3）研究發(fā)現(xiàn)T2噬菌體屬于噬菌體中的一類，除此之外還有λ噬菌體等，λ噬菌體的性質較“溫和”感染細菌后并不使細菌死亡而是將自身的DNA插入進細菌的DNA，隨細菌DNA一起復制，所以常用于基因工程中做為（工具）．假定原宿主細胞中某一DNA片段含有3000個堿基對，其中G+C占堿基總數(shù)的30%，插入后的DNA整段轉錄形成的mRNA含有4000個堿基，其中A和U占60%，則插入進來的噬菌體DNA片段中A+T占該插入片段堿基總數(shù)的比例為．
（4）圖2的“肺炎雙球菌轉化實驗”得出的結論是．加熱殺死的S型菌中的DNA仍有活性的原因可能是．發(fā)布：2025/1/3 8:0:1組卷：91引用：1難度：0.3
把好題分享給你的好友吧~~