內(nèi)皮素（ET）是一種含21個氨基酸的多肽，具有強烈的促進血管收縮和促進平滑肌細胞增殖等作用，其功能異常與高血壓、糖尿病、癌癥等有著密切聯(lián)系。內(nèi)皮素（ET）主要通過與靶細胞膜上的ET受體（ET_A）結(jié)合而發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)?？蒲腥藛T通過構(gòu)建表達載體，實現(xiàn)ET_A基因在大腸桿菌細胞中的高效表達，其過程如圖所示，圖中SNAP基因是一種熒光蛋白基因，限制酶Apa I的識別序列為，限制酶Xho I的識別序列為。
請據(jù)圖分析回答：

（1）進行過程①時，需要加入緩沖液、引物、脫氧核苷酸和

逆轉(zhuǎn)錄

逆轉(zhuǎn)錄

酶等。完成過程①②③的目的是

獲取目的基因（ETA）基因

獲取目的基因（ETA）基因

。
（2）過程③和⑤中，限制酶Xho I切割DNA，使

磷酸二酯

磷酸二酯

鍵斷開，形成的黏性末端是

。用兩種限制酶切割，獲得不同的黏性末端，其主要目的是

使目的基因定向連接到運載體上（或防止目的基因環(huán)化）

使目的基因定向連接到運載體上（或防止目的基因環(huán)化）

。
（3）構(gòu)建的重組表達載體，目的基因上游的啟動子是

RNA聚合酶識別和結(jié)合

RNA聚合酶識別和結(jié)合

的部位，進而可驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄。除圖中已標(biāo)出的結(jié)構(gòu)外，基因表達載體還應(yīng)具有的結(jié)構(gòu)是

復(fù)制原點、終止子

復(fù)制原點、終止子

。
（4）過程⑥要用CaCl₂預(yù)先處理大腸桿菌，使其成為容易吸收外界DNA的

感受態(tài)

感受態(tài)

細胞。
（5）將SNAP基因與ETA基因結(jié)合構(gòu)成融合基因，其目的是有利于檢測

ETA基因能否表達及表達量

ETA基因能否表達及表達量

。
（6）大腸桿菌等原核生物不僅可以作為基因工程的受體細胞，它們往往還含有一些有重要價值的外源基因，而這些外源基因無需改造和修飾就可在葉綠體中高效表達，原因是

葉綠體DNA與原核生物DNA結(jié)構(gòu)類似

葉綠體DNA與原核生物DNA結(jié)構(gòu)類似

?；蚬こ滩僮鲿r可將外源基因整合到葉綠體基因組中，不僅能有效改良植物的品質(zhì)，還由于葉綠體轉(zhuǎn)基因不會隨

花粉

花粉

（“花粉”或“卵細胞”）傳給后代，從而能在一定程度上避免轉(zhuǎn)基因作物中的外源基因擴散到其他同類作物。