Rag₂基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞?？蒲腥藛T利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對(duì)Rag₂基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療。其技術(shù)流程如圖：

（1）①中在核移植前通常使用

顯微操作方法

顯微操作方法

 去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核。
（2）步驟中，重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時(shí)，可從其

內(nèi)細(xì)胞團(tuán)

內(nèi)細(xì)胞團(tuán)

分離出ES細(xì)胞。在培養(yǎng)液中添加

分化誘導(dǎo)因子

分化誘導(dǎo)因子

，如牛黃酸等化學(xué)物質(zhì)時(shí)，就可誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同組織分化。
（3）步驟③中，需要構(gòu)建含有Rag₂因的表達(dá)載體。可以根據(jù)Rag₂基因的

核苷酸序列

核苷酸序列

設(shè)計(jì)引物，利用

PCR

PCR

 技術(shù)擴(kuò)增Rag₂基因片段。該基因表達(dá)載體的組成，還必須有

啟動(dòng)子

啟動(dòng)子

、

終止子

終止子

以及標(biāo)記基因等。
（4）為檢測(cè)Rag₂基因的表達(dá)情況，除分子檢測(cè)外，有時(shí)還管要進(jìn)行

個(gè)體生物學(xué)

個(gè)體生物學(xué)

水平的堅(jiān)定。