Rag₂基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細胞?？蒲腥藛T利用胚胎干細胞（ES細胞）對Rag₂基因缺失小鼠進行基因治療。其技術(shù)流程如圖：

（1）①中在核移植前通常使用

顯微操作方法

顯微操作方法

 去除卵母細胞的細胞核。
（2）步驟中，重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時，可從其

內(nèi)細胞團

內(nèi)細胞團

分離出ES細胞。在培養(yǎng)液中添加

分化誘導(dǎo)因子

分化誘導(dǎo)因子

，如牛黃酸等化學(xué)物質(zhì)時，就可誘導(dǎo)ES細胞向不同組織分化。
（3）步驟③中，需要構(gòu)建含有Rag₂因的表達載體?？梢愿鶕?jù)Rag₂基因的

核苷酸序列

核苷酸序列

設(shè)計引物，利用

PCR

PCR

 技術(shù)擴增Rag₂基因片段。該基因表達載體的組成，還必須有

啟動子

啟動子

、

終止子

終止子

以及標記基因等。
（4）為檢測Rag₂基因的表達情況，除分子檢測外，有時還管要進行

個體生物學(xué)

個體生物學(xué)

水平的堅定。