Ⅰ型糖尿病的病因是胰島B細胞損傷,Ⅱ型糖尿病多表現(xiàn)為對胰島素不敏感,不同類型糖尿病臨床治療方案不同??挂葝u素抗體可快速檢測胰島素含量,為臨床診斷提供依據(jù)。如圖為某科研小組制備抗胰島素單克隆抗體的流程。請回答下列問題:
(1)實驗開始時需給實驗小鼠多次注射
胰島素
胰島素
,目的是 為了獲得更多能夠產(chǎn)生抗胰島素抗體的B淋巴細胞
為了獲得更多能夠產(chǎn)生抗胰島素抗體的B淋巴細胞
。經(jīng)過免疫反應后提取出的B淋巴細胞無法通過直接進行動物細胞培養(yǎng)獲得大量抗體,其原因是 淋巴細胞不能無限增殖而且壽命有限
淋巴細胞不能無限增殖而且壽命有限
。
(2)雜交瘤細胞的特點是 既能迅速大量繁殖,又能產(chǎn)生專一的抗體
既能迅速大量繁殖,又能產(chǎn)生專一的抗體
(答出兩點)。研究發(fā)現(xiàn),細胞中DNA合成有D和S兩條途徑,氨基嘌呤可以阻斷D途徑而不能阻斷S途徑。在HAT培養(yǎng)基(起選擇作用的一種培養(yǎng)基)中加入氨基嘌呤后,未融合的親本細胞和同種細胞融合形成的細胞均因DNA無法復制而死亡,只有雜交瘤細胞能連續(xù)增殖。據(jù)此判斷雜交瘤細胞DNA合成存在以上的 D和S
D和S
途徑。
(3)陽性克隆擴大培養(yǎng)常用有限稀釋法,即將專一抗體檢驗陽性的細胞稀釋到7~10個/mL,每孔加入細胞稀釋液的體積為 0.1
0.1
mL(填“0.1”、“1”或“10”),使每個孔內(nèi)不多于一個細胞,達到單克隆培養(yǎng)目的。
(4)成人隱匿性糖尿?。↙ADA)的病理進程比較緩慢,早期表現(xiàn)酷似Ⅱ型糖尿病,后期逐漸呈現(xiàn)Ⅰ型糖尿病病征,LADA的臨床診斷,除了做必要的抗體和生化指標檢驗外,還有一個標準是診斷后至少六個月不需要進行胰島素治療。據(jù)此推測該標準的設立依據(jù)是 LADA早期胰島B細胞沒有受損,胰島素較充足,機體對胰島素不敏感且病理進程比較緩慢
LADA早期胰島B細胞沒有受損,胰島素較充足,機體對胰島素不敏感且病理進程比較緩慢
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