研究表明,Lm-PB2蛋白在細胞核內(nèi)起調(diào)節(jié)細胞周期的作用。為研究Lm一PHB2蛋白的生物學活性,研究人員進行了以下實驗.RT-PCR是將RNA的反轉錄(逆轉錄,RT)和cDNA的聚合酶鏈擴增(PCR)相結合的技術,LacZ基因的編碼產(chǎn)物在X-gal和IPTG存在下,可使大腸桿菌菌落呈現(xiàn)藍色,否則菌落呈現(xiàn)白色?;卮鹣铝袉栴}:
(1)過程①需要的酶有 逆轉錄酶和Taq酶逆轉錄酶和Taq酶,該過程需要在目的基因上添加適宜的酶切位點,擴增時,引物和酶切位點的設計依據(jù)分別是 Lm-PHB2基因兩側的脫氧核苷酸序列Lm-PHB2基因兩側的脫氧核苷酸序列和 HindⅢ和EcoRI識別的脫氧核苷酸序列HindⅢ和EcoRI識別的脫氧核苷酸序列。
(2)過程③中篩選和培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基中需要加入 X-gal、IPTG、卡那霉素X-gal、IPTG、卡那霉素和碳源、氮源、水和無機鹽等物質(zhì),挑取 白白色菌落中的微生物培養(yǎng)并提取質(zhì)粒,用限制酶進行酶切,再對產(chǎn)物進行檢測
(3)為檢測過程⑤得到的大腸桿菌是否表達Lm-PHB2基因,研究人員以注射了 Lm-PHB2蛋白Lm-PHB2蛋白后獲得的小鼠B淋巴細胞和骨髓瘤細胞制備單克隆抗體,之后再用制備的單克隆抗體與大腸桿菌中蛋白質(zhì)進行 抗原一抗體雜交抗原一抗體雜交實驗。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】逆轉錄酶和Taq酶;Lm-PHB2基因兩側的脫氧核苷酸序列;HindⅢ和EcoRI識別的脫氧核苷酸序列;X-gal、IPTG、卡那霉素;白;Lm-PHB2蛋白;抗原一抗體雜交
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/8/21 9:0:4組卷:6引用:3難度:0.5
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1.下列有關基因工程技術和蛋白質(zhì)工程技術敘述正確的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7 -
2.幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉入植物體內(nèi),可增強其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括
(2)生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
(3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
(4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
(5)若獲得的轉基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6 -
3.下列有關基因工程的敘述,正確的是( )
發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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