科研小組利用基因工程技術(shù)將“抗蟲基因”轉(zhuǎn)入棉花細(xì)胞成功培育出抗蟲棉，該技術(shù)所用的含“抗蟲基因”的DNA與質(zhì)粒上相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)分別如圖1、圖2所示（不同限制酶的識(shí)別序列和酶切位點(diǎn)：BamHⅠ5′-G↓GATCC-3′，BclⅠ5′-T↓GATCA-3′，Sau3AⅠ5′-↓GATC-3′，HindⅢ5′-A↓AGCTT-3′）。請(qǐng)分析并回答下列問(wèn)題：
（1）通過(guò)PCR擴(kuò)增獲得“抗蟲基因”時(shí)，依據(jù) 目的基因的脫氧核苷酸序列目的基因的脫氧核苷酸序列設(shè)計(jì)引物，引物的作用是 使DNA聚合酶（Taq酶）從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶（Taq酶）從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸。
（2）培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的核心工作是 構(gòu)建基因表達(dá)載體構(gòu)建基因表達(dá)載體?？蒲腥藛T分別使用HindⅢ和Sau3AⅠ兩種限制酶處理含目的基因的DNA片段，用HindⅢ和BamHⅠ兩種限制酶處理質(zhì)粒，試分析切割質(zhì)粒時(shí)用限制酶BamHⅠ替換Sau3AⅠ的原因 限制酶Sau3AⅠ和BamHⅠ酶切以后產(chǎn)生相同的黏性末端限制酶Sau3AⅠ和BamHⅠ酶切以后產(chǎn)生相同的黏性末端。
（3）欲確定“抗蟲基因”是否表達(dá)出“抗蟲蛋白”，在分子水平上的檢測(cè)方法是 抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交，該方法的原理是 抗體與相應(yīng)的抗原發(fā)生特異性免疫反應(yīng)抗體與相應(yīng)的抗原發(fā)生特異性免疫反應(yīng)。
（4）生產(chǎn)上常將轉(zhuǎn)基因抗蟲棉與非轉(zhuǎn)基因棉花混合播種，目的是 減緩棉鈴蟲種群抗蟲基因頻率的增加速度減緩棉鈴蟲種群抗蟲基因頻率的增加速度。
（5）在基因工程的操作過(guò)程中，標(biāo)記基因在檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體菌方面廣泛應(yīng)用。環(huán)絲氨酸輔助篩選法：四環(huán)素能使細(xì)菌停止生長(zhǎng)但不致死；環(huán)絲氨酸能使正常生長(zhǎng)的細(xì)菌致死，而對(duì)停止生長(zhǎng)的細(xì)菌不致死。某質(zhì)粒如圖3所示（Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Tetr表示四環(huán)素抗性基因），Tetr中插入目的基因后失活。
用此質(zhì)粒構(gòu)建表達(dá)載體，轉(zhuǎn)化細(xì)菌后，結(jié)果有3種：未轉(zhuǎn)化的細(xì)菌（無(wú)外源DNA進(jìn)入）、含空質(zhì)粒（沒有連接目的基因的質(zhì)粒）的細(xì)菌、含重組質(zhì)粒的細(xì)菌。
①用含有 四環(huán)素四環(huán)素和 環(huán)絲氨酸環(huán)絲氨酸的培養(yǎng)基對(duì)上述3種細(xì)菌進(jìn)行篩選，只有含空質(zhì)粒的細(xì)菌被淘汰，理由是 含空質(zhì)粒的細(xì)菌環(huán)絲氨酸使其致死含空質(zhì)粒的細(xì)菌環(huán)絲氨酸使其致死。
②在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選出含重組質(zhì)粒的細(xì)菌，還需使用含有 氨芐青霉素氨芐青霉素的培養(yǎng)基。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】目的基因的脫氧核苷酸序列；使DNA聚合酶（Taq酶）從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸；構(gòu)建基因表達(dá)載體；限制酶Sau3AⅠ和BamHⅠ酶切以后產(chǎn)生相同的黏性末端；抗原-抗體雜交；抗體與相應(yīng)的抗原發(fā)生特異性免疫反應(yīng)；減緩棉鈴蟲種群抗蟲基因頻率的增加速度；四環(huán)素；環(huán)絲氨酸；含空質(zhì)粒的細(xì)菌環(huán)絲氨酸使其致死；氨芐青霉素
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：11引用：2難度：0.6
相似題
-
1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
把好題分享給你的好友吧~~