科研人員通過PCR獲得肝細(xì)胞特異性啟動(dòng)子——白蛋白啟動(dòng)子，將該啟動(dòng)子與Cre重組酶基因結(jié)合構(gòu)建表達(dá)載體，培育出在肝細(xì)胞特異性表達(dá)Cre重組酶的轉(zhuǎn)基因小鼠。請(qǐng)回答下列問題：
（1）PCR實(shí)質(zhì)是體外DNA復(fù)制，每次循環(huán)一般分為 變性、復(fù)性和延伸變性、復(fù)性和延伸三個(gè)環(huán)節(jié)。
（2）構(gòu)建表達(dá)載體是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體含有啟動(dòng)子、目的基因（Cre重組酶基因）、標(biāo)記基因和終止子等，其中啟動(dòng)子的作用是 RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合部位，驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合部位，驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄。
（3）基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞，受體細(xì)胞常選用受精卵的原因是 受精卵全能性強(qiáng)，易發(fā)育成個(gè)體受精卵全能性強(qiáng)，易發(fā)育成個(gè)體。
（4）轉(zhuǎn)基因小鼠的培育過程中還需要胚胎移植，胚胎移植實(shí)質(zhì)上是 早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移；轉(zhuǎn)基因小鼠培育成功的標(biāo)志是 肝細(xì)胞內(nèi)能特異性表達(dá)Cre重組酶肝細(xì)胞內(nèi)能特異性表達(dá)Cre重組酶。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定；體外受精和胚胎移植．
【答案】變性、復(fù)性和延伸；RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合部位，驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄；受精卵全能性強(qiáng)，易發(fā)育成個(gè)體；早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移；肝細(xì)胞內(nèi)能特異性表達(dá)Cre重組酶
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：1引用：1難度：0.5
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對(duì)定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
2．PCR技術(shù)不僅可以擴(kuò)增目的基因，還可用于定點(diǎn)誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點(diǎn)突變技術(shù)。大引物PCR需要用到引物進(jìn)行兩次PCR，其操作步驟為：
①根據(jù)目的基因序列設(shè)計(jì)引物，得到兩個(gè)常規(guī)引物，分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物；
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設(shè)計(jì)突變上游引物，突變位點(diǎn)位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進(jìn)行第一次PCR反應(yīng)得到下游大引物；
④用得到的下游大引物中和另一個(gè)常規(guī)上游引物進(jìn)行第二次PCR擴(kuò)增，得到突變目的基因序列?；卮鹣铝袉栴}：
（1）PCR擴(kuò)增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關(guān)，DNA中G+C的含量越多，要求的變性溫度越高。其原因是。該P(yáng)CR擴(kuò)增技術(shù)所需的基本條件是種引物、原料、模板、。
（2）在第一次PCR反應(yīng)中，形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過次復(fù)制。第一次PCR的產(chǎn)物DNA的條鏈作為第二次PCR所用的引物。與X射線誘變相比，該突變技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是。
（3）如果要利用微生物進(jìn)一步克隆PCR定點(diǎn)誘變產(chǎn)物，其步驟包括：、、微生物的篩選和培養(yǎng)、從菌群中獲取更多目的基因。將獲取目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行連接后，需先用處理農(nóng)桿菌以便將基因表達(dá)載體導(dǎo)入馬鈴薯細(xì)胞，將馬鈴薯細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗時(shí)經(jīng)過的兩個(gè)過程是。檢測(cè)目的基因是否在馬鈴薯細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄出了mRNA，所采用的方法是。發(fā)布：2024/12/30 23:0:2組卷：32引用：3難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯(cuò)誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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