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基因工程乙肝疫苗是乙肝表面抗原（HBsAg）亞單位疫苗，制作過程是采用現(xiàn)代生物技術將乙肝病毒表達表面抗原的基因進行質(zhì)粒構(gòu)建，將其導入CHO細胞（中國倉鼠卵巢細胞）中，通過培養(yǎng)這種CHO細胞來表達乙肝表面抗原亞單位，從而獲得疫苗，基本流程如圖1所示。請回答下列問題。

（1）要獲取HBsAg基因，除圖中方法外，還可以根據(jù)表面抗原蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)推測
氨基酸序列
氨基酸序列
，進而推測目的基因的脫氧核苷酸序列，再進行人工合成。
（2）圖中①過程選用的限制酶是
HindⅢ和XhoⅠ
HindⅢ和XhoⅠ
，理由是
HBsAg基因含有限制酶HindⅢ、SamⅠ和XhoⅠ的切割位點，但限制酶SamⅠ的切割位點位于目的基因上，若選用限制酶SmaⅠ則會破壞目的基因
HBsAg基因含有限制酶HindⅢ、SamⅠ和XhoⅠ的切割位點，但限制酶SamⅠ的切割位點位于目的基因上，若選用限制酶SmaⅠ則會破壞目的基因
。
（3）利用PCR技術擴增HBsAg基因片段的前提條件是
要有一段已知目的基因的核苷酸序列
要有一段已知目的基因的核苷酸序列
，以便合成引物。圖2是某同學設計的一組引物（只標注了部分堿基序列）：

該組引物是否合理
否
否
，理由是
引物Ⅱ自身折疊后會出現(xiàn)局部堿基互補配對，這影響了與模板的堿基互補配對
引物Ⅱ自身折疊后會出現(xiàn)局部堿基互補配對，這影響了與模板的堿基互補配對
。
（4）若一個HBsAg基因通過PCR擴增了4次，在子代基因中同時含有兩個引物的基因占
7
8
7
8
。
（5）HBsAg基因在CHO細胞中表達需要有特異性的
啟動子
啟動子
，控制基因表達的起始時間和表達程度。HBsAg基因能否在CHO細胞中穩(wěn)定遺傳的關鍵是
CHO細胞的DNA上是否插入了HBsAg基因
CHO細胞的DNA上是否插入了HBsAg基因
。

【答案】氨基酸序列；HindⅢ和XhoⅠ；HBsAg基因含有限制酶HindⅢ、SamⅠ和XhoⅠ的切割位點，但限制酶SamⅠ的切割位點位于目的基因上，若選用限制酶SmaⅠ則會破壞目的基因；要有一段已知目的基因的核苷酸序列；否；引物Ⅱ自身折疊后會出現(xiàn)局部堿基互補配對，這影響了與模板的堿基互補配對；

；啟動子；CHO細胞的DNA上是否插入了HBsAg基因

【解答】

【點評】

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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：22引用：1難度：0.6

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1．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）在進行基因工程操作時，先要從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA，以mRNA為材料可以獲得cDNA，其原理是

。
（2）若要使目的基因在受體細胞中表達，需要構(gòu)建基因表達載體，其組成除了幾丁質(zhì)酶基因外，還包括

、

、

，其中

與目的基因的轉(zhuǎn)錄開始有關。
（3）當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是

。
（4）如何從個體水平鑒定轉(zhuǎn)基因植物有無抗真菌病的能力？

。
（5）若幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中獲得了轉(zhuǎn)基因植株，但植株抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是

。
發(fā)布：2024/10/31 8:0:1組卷：4引用：1難度：0.7
解析