定點突變技術是指通過PCR等方法改變DNA片段特定位點的堿基，從而獲得突變基因的操作技術。研究者將釀酒酵母S288c的APAⅠ基因與EGFP（增強型綠色熒光蛋白）基因構成融合基因，并進一步構建表達載體，以該載體為模板，再通過PCR介導的定點突變技術向APAⅠ基因中分別引入APAⅠ-1/2/3/4四個突變位點，分別轉化釀酒酵母YS59?；卮鹣铝袉栴}：
（1）構建APAⅠ基因與EGFP基因的融合基因時.需借助的工具酶是 限制酶、DNA連接酶限制酶、DNA連接酶，使APAⅠ基因與EGFP基因首尾相連，處在同一 啟動子啟動子、終止子終止子等調控序列的控制之下；EGFP基因的作用是 作為標記基因作為標記基因。
（2）上述PCR介導的定點誘變過程中，除以載體為模板外，還需要加入四種 脫氧核苷酸脫氧核苷酸，兩種根據(jù) APA1基因APA1基因的序列設計合成且含有突變位點的互補的引物。
（3）若在熒光顯微鏡下觀察到受體細胞有綠色熒光，表明 APA1基因與EGFP基因已經表達（形成蛋白質產物）APA1基因與EGFP基因已經表達（形成蛋白質產物）。
（4）若將定點突變的基因導入植物細胞，在一定 營養(yǎng)和激素營養(yǎng)和激素（答出2點）等條件下，轉基因細胞經過脫分化形成 愈傷組織愈傷組織，進一步誘導其 再分化再分化可以發(fā)育成轉基因植株。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】限制酶、DNA連接酶；啟動子；終止子；作為標記基因；脫氧核苷酸；APA1基因；APA1基因與EGFP基因已經表達（形成蛋白質產物）；營養(yǎng)和激素；愈傷組織；再分化
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網所有，未經書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：12引用：3難度：0.7
相似題
-
1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
把好題分享給你的好友吧~~