當(dāng)前位置： 2021年四川省南充市高考生物三診試卷> 試題詳情

大腸桿菌β-半乳糖苷酶（Z酶）可催化底物（X-gal）水解產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)。在pUC18質(zhì)粒中，lacZ′編碼Z酶氨基端的一個(gè)片段（稱為α-肽），該質(zhì)粒結(jié)構(gòu)及限制酶識(shí)別位點(diǎn)如圖甲所示。已知α-肽、缺失α-肽的Z酶片段單獨(dú)存在時(shí)均無Z酶活性，共同存在時(shí)就會(huì)表現(xiàn)出Z酶活性。利用圖乙中的DNA片段與pUC18質(zhì)粒進(jìn)行基因工程操作。

（1）限制酶能催化雙鏈DNA分子中
磷酸二酯鍵
磷酸二酯鍵
（填化學(xué)鍵名稱）的斷裂。本實(shí)驗(yàn)可使用限制酶
Sal I
Sal I
處理pUC18質(zhì)粒和圖乙中的DNA片段，再通過DNA連接酶連接，獲得含目的基因的重組質(zhì)粒。
（2）用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，然后將大腸桿菌接種到含氨芐青霉素的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，由于未發(fā)生轉(zhuǎn)化的大腸桿菌沒有該質(zhì)粒，因而不具有
氨芐青霉素抗性
氨芐青霉素抗性
，在該培養(yǎng)基上不能生長。從功能上劃分，該培養(yǎng)基屬于
選擇
選擇
培養(yǎng)基。
（3）當(dāng)上述培養(yǎng)基中含有X-gal時(shí)，生長出的菌落有藍(lán)色和白色兩種類型，其中含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌的菌落顏色為
白色
白色
，這是因?yàn)?!--BA-->
目的基因與質(zhì)粒連接后使lacZ′被破壞，不能合成α-肽
目的基因與質(zhì)粒連接后使lacZ′被破壞，不能合成α-肽
。為保證能通過菌落顏色辨別出含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌，本實(shí)驗(yàn)作為受體細(xì)胞的大腸桿菌中Z酶基因應(yīng)滿足的條件是
編碼α-肽的DNA序列缺失，其他序列正常
編碼α-肽的DNA序列缺失，其他序列正常
。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．

【答案】磷酸二酯鍵；Sal I；氨芐青霉素抗性；選擇；白色；目的基因與質(zhì)粒連接后使lacZ′被破壞，不能合成α-肽；編碼α-肽的DNA序列缺失，其他序列正常

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：44引用：3難度：0.7

相似題

1．番茄含有豐富的維生素，但不耐寒?？茖W(xué)家將魚的抗凍蛋白基因?qū)敕鸭?xì)胞，并進(jìn)行組織培養(yǎng)得到轉(zhuǎn)基因番茄植株，并將該植株種植在寒冷環(huán)境中，發(fā)現(xiàn)番茄植株并無抗寒性狀。為了找出不抗寒的原因，科學(xué)家提取轉(zhuǎn)基因番茄細(xì)胞中的有關(guān)成分進(jìn)行了如下分析?；卮鹣铝袉栴}：
（1）提取細(xì)胞中的

，采用抗原―抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測，若能檢測到抗凍蛋白，但含量非常少，其原因可能是

。魚的抗凍蛋白基因能在番茄細(xì)胞內(nèi)成功表達(dá)的理論基礎(chǔ)是

。
（2）若經(jīng)上一步檢測確定細(xì)胞中無抗凍蛋白，可采用分子雜交技術(shù)檢測細(xì)胞中的RNA和DNA。該技術(shù)依據(jù)的原理是

，檢測過程中需使用DNA探針進(jìn)行檢測，若出現(xiàn)DNA―RNA的雜交帶，說明

，則可能是

導(dǎo)致無抗凍蛋白。
（3）若經(jīng)檢測確定細(xì)胞中無抗凍蛋白的mRNA，使用DNA探針對(duì)細(xì)胞內(nèi)的基因組DNA進(jìn)行檢測，若出現(xiàn)DNA―DNA的雜交帶，說明

，則可能是抗凍蛋白基因反向插入質(zhì)粒中導(dǎo)致抗凍蛋白基因無法正常表達(dá)。若經(jīng)檢測確定細(xì)胞中無抗凍蛋白基因，說明在轉(zhuǎn)化過程中，可能導(dǎo)入番茄細(xì)胞的是

（填“普通質(zhì)?！被颉爸亟M質(zhì)粒”）。
發(fā)布：2024/11/8 11:0:1組卷：5引用：1難度：0.5
解析

2．運(yùn)用現(xiàn)代生物技術(shù)的育種方法，將抗菜青蟲的Bt基因轉(zhuǎn)移到優(yōu)質(zhì)油菜中，培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲的油菜品種，這一品種在生長過程中能產(chǎn)生特異的殺蟲蛋白質(zhì)，對(duì)菜青蟲有顯著抗性，能大大減輕菜青蟲對(duì)油菜的危害，提高油菜產(chǎn)量，減少農(nóng)藥使用，據(jù)以上信息，下列敘述正確的是（　　）

A．Bt基因的化學(xué)成分是蛋白質(zhì)

B．Bt基因中有菜青蟲的遺傳物質(zhì)

C．轉(zhuǎn)基因抗蟲油菜能產(chǎn)生殺蟲蛋白是由于具有Bt基因

D．轉(zhuǎn)基因抗蟲油菜產(chǎn)生的殺蟲蛋白是無機(jī)物

發(fā)布：2024/11/7 11:0:1組卷：104引用：32難度：0.7

解析

3．CAR-T療法僅僅靠打針就能殺死癌細(xì)胞，一時(shí)間讓國內(nèi)醫(yī)藥圈為之沸騰。CAR-T療法的全稱是嵌合抗原受體T細(xì)胞療法，CAR-T療法的操作步驟是：①直接采取患者的外周血，分離出其中的T淋巴細(xì)胞；②將分離的T淋巴細(xì)胞在體外進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)改造，裝載上具有識(shí)別腫瘤抗原的受體及其刺激分子，形成CAR-T細(xì)胞；③將CAR-T細(xì)胞在體外進(jìn)行培養(yǎng)，大量擴(kuò)增讓其數(shù)量成倍增加；④體外擴(kuò)增后再回輸?shù)交颊唧w內(nèi)，從而識(shí)別并攻擊自身的腫瘤細(xì)胞。改造細(xì)胞回輸體內(nèi)后，這些細(xì)胞一旦遇見表達(dá)對(duì)應(yīng)抗原的腫瘤細(xì)胞，便會(huì)被激活并再擴(kuò)增，發(fā)揮其極大的特異殺傷力，殺死癌細(xì)胞?；卮鹣铝袉栴}：
（1）從患者體內(nèi)分離的T淋巴細(xì)胞，需要對(duì)其進(jìn)行基因工程改造，以得到CAR-T細(xì)胞。
①基因工程最核心的步驟是

。
②構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，一般將目的基因插在啟動(dòng)子和終止子之間。啟動(dòng)子的作用是

。
③可以通過PCR技術(shù)獲得大量目的基因，利用該技術(shù)時(shí)擴(kuò)增目的基因時(shí)每次循環(huán)可分為

三步，其中第三步所使用的酶是

。
（2）體外培養(yǎng)患者CAR-T細(xì)胞時(shí)，不僅要確保

的環(huán)境條件，還要定期更換培養(yǎng)液，這樣做的目的是

。
（3）結(jié)合題干信息分析，CAR-T療法價(jià)格高昂的原因可能是

（答出2點(diǎn)即可）。
發(fā)布：2024/11/8 11:59:57組卷：3引用：2難度：0.5
解析

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