“采菊東籬下，悠然見南山”，菊花是中國十大名花之一，為了增加菊花花色類型，研究者從其他植物中克隆出花色基因C，擬將其與質(zhì)粒（圖2）重組，再借助農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花中。請(qǐng)回答相關(guān)問題：

（1）研究者從其他植物中克隆出花色基因時(shí)，采用了PCR技術(shù)擴(kuò)增，擴(kuò)增過程需要花色基因C、兩對(duì)引物之外，還需要

（4種）脫氧核苷酸

（4種）脫氧核苷酸

、

耐高溫的DNA聚合酶（或TaqDNA聚合酶）

耐高溫的DNA聚合酶（或TaqDNA聚合酶）

。PCR 反應(yīng)中的每次循環(huán)可分為變性、復(fù)性、

延伸

延伸

三步，其中復(fù)性是指：當(dāng)溫度下降到50℃左右時(shí)，

兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合（兩種引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合）

兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合（兩種引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合）

。
（2）圖1是花色基因C兩側(cè)被EcoRⅠ酶切后所形成的末端結(jié)構(gòu)，請(qǐng)寫出EcoRⅠ酶識(shí)別序列并標(biāo)出切點(diǎn)：

。
（3）為防止目的基因C的自身環(huán)化和任意連接，有同學(xué)認(rèn)為可以用EcoRⅠ和BamHⅠ兩種酶切割含C基因的DNA分子和圖中質(zhì)粒，有同學(xué)認(rèn)為不妥，理由是

花色基因C兩側(cè)沒有HamHⅠ的識(shí)別序列，不能被BamHⅠ酶切；質(zhì)粒被EcoRⅠ和BamHⅠ兩種酶切后不能使目的基因連接在啟動(dòng)子和終止子之間

花色基因C兩側(cè)沒有HamHⅠ的識(shí)別序列，不能被BamHⅠ酶切；質(zhì)粒被EcoRⅠ和BamHⅠ兩種酶切后不能使目的基因連接在啟動(dòng)子和終止子之間

（答出兩點(diǎn)理由）。
（4）最后需要將重組質(zhì)粒導(dǎo)入菊花細(xì)胞，研究者農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，這是利用了農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒的T-DNA的特性：

可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體DNA上

可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體DNA上

。若導(dǎo)入的是菊花體細(xì)胞，還需要通過

植物組織培養(yǎng)

植物組織培養(yǎng)

才能得到菊花植株。
（5）在個(gè)體生物學(xué)水平上，如何鑒定轉(zhuǎn)基因菊花培育是否成功？

觀察轉(zhuǎn)基因菊花是否表現(xiàn)出基因C所控制的花色

觀察轉(zhuǎn)基因菊花是否表現(xiàn)出基因C所控制的花色

。