研究表明,HER2/neu是一種原癌基因,它表達(dá)的H蛋白在多種惡性腫瘤特別是乳腺癌細(xì)胞中過(guò)量表達(dá).抗H蛋白單克隆抗體能抑制過(guò)量表達(dá)H蛋白的乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng),目前已成為有效的生物治療手段.
(1)選擇H蛋白作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn),是因?yàn)镠蛋白在成年個(gè)體的正常組織中低表達(dá)低表達(dá)(填“低表達(dá)”或“高表達(dá)”).H蛋白是一個(gè)跨膜蛋白,結(jié)構(gòu)如圖所示.制備免疫小鼠用的H蛋白(抗原)時(shí),應(yīng)構(gòu)建胞外胞外區(qū)基因,轉(zhuǎn)入原核細(xì)胞表達(dá)并提純.
(2)將H蛋白注射到小鼠體內(nèi),取該小鼠的脾臟細(xì)胞與骨髓瘤骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合,使用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是PEG(或“聚乙二醇”)PEG(或“聚乙二醇”),細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性.
(3)將融合細(xì)胞在選擇選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng),一段時(shí)間后培養(yǎng)基中只有雜交瘤細(xì)胞生長(zhǎng).將雜交瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)到多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng),應(yīng)用抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交技術(shù)進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè).經(jīng)多次篩選,就能得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞.
(4)將篩選得到的雜交瘤細(xì)胞,經(jīng)過(guò)體外(培養(yǎng))體外(培養(yǎng))或小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng),獲取大量的單克隆抗體.
(5)治療乳腺癌時(shí),可單獨(dú)使用抗H蛋白單克隆抗體,也可將該單克隆抗體與抗癌藥物結(jié)合構(gòu)建“生物導(dǎo)彈”,殺死癌細(xì)胞.這充分體現(xiàn)了單克隆抗體特異性強(qiáng)(或“識(shí)別抗原部位專(zhuān)一”)特異性強(qiáng)(或“識(shí)別抗原部位專(zhuān)一”)的特點(diǎn).
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】低表達(dá);胞外;骨髓瘤;PEG(或“聚乙二醇”);細(xì)胞膜的流動(dòng)性;選擇;抗原-抗體雜交;體外(培養(yǎng));特異性強(qiáng)(或“識(shí)別抗原部位專(zhuān)一”)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:78引用:6難度:0.5
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1.為實(shí)現(xiàn)對(duì)肝癌的有效治療,研究人員通過(guò)比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點(diǎn),制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
(1)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)。CLDN6蛋白是一個(gè)跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時(shí),應(yīng)提取
(2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
(3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無(wú)關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞,檢測(cè)細(xì)胞活力,結(jié)果如圖1:
由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞,依據(jù)是
(4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機(jī)制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6 -
2.為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用,某研究團(tuán)隊(duì)對(duì)鼠源單克隆抗體F進(jìn)行改造,制備了人—鼠嵌合抗體F′,具體流程為:提取鼠源雜交瘤細(xì)胞RNA,逆轉(zhuǎn)錄后通過(guò)PCR擴(kuò)增抗體F的基因序列,將其部分序列用人的相應(yīng)抗體基因序列進(jìn)行替換,再構(gòu)建表達(dá)載體,在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測(cè)抗體性質(zhì),他們測(cè)定了F′單獨(dú)與抗原作用時(shí)對(duì)抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時(shí)與抗原作用(F′與F初始濃度相同)時(shí)F′對(duì)抗原的結(jié)合能力,結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202304/369/62ee43c5.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布:2024/12/19 1:0:1組卷:39引用:4難度:0.5 -
3.2020年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予發(fā)現(xiàn)丙肝病毒的三位科學(xué)家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化,部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。如圖為利用小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料研制丙肝病毒的單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)流程。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?br />
發(fā)布:2024/12/19 6:0:1組卷:42引用:2難度:0.6
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