基因工程技術應用范圍越來越廣,請根據(jù)基因工程技術有關知識回答問題:
(1)目前,基因工程中使用的限制酶能將DNA每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的化學鍵斷開,從而產(chǎn)生黏性末端或平末端,能連接黏性末端和平末端的DNA連接酶是 T4DNA連接酶T4DNA連接酶。
(2)為在短時間內(nèi)大量獲得目的基因,可用的技術是 PCRPCR,此技術需用 Taq酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶)Taq酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶)酶。目的基因獲取之后,需要進行 構(gòu)建基因表達載體構(gòu)建基因表達載體,此步驟是基因工程的核心。質(zhì)粒運載體用EcoRⅠ切割后產(chǎn)生的片段如下:
AATTC……GG……CTTAA
為使運載體與目的基因相連,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,還可用另一種限制性核酸內(nèi)切酶切割,該酶必須具有的特點是 切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的相同切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的相同。
(3)將一段目的基因通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入植物細胞,構(gòu)建重組質(zhì)粒時,目的基因和標記基因都應該位于Ti質(zhì)粒的 T-DNAT-DNA片段內(nèi),原因是 Ti質(zhì)粒上只有T-DNA片段能夠整合到受體細胞的染色體Ti質(zhì)粒上只有T-DNA片段能夠整合到受體細胞的染色體。要檢測目的基因在受體細胞中是否轉(zhuǎn)錄出mRNA,檢測方法是采用 分子雜交技術分子雜交技術。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】T4DNA連接酶;PCR;Taq酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶);構(gòu)建基因表達載體;切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的相同;T-DNA;Ti質(zhì)粒上只有T-DNA片段能夠整合到受體細胞的染色體;分子雜交技術
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:13引用:1難度:0.7
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