T-DNA插人失活技術(shù)是目前使用最為廣泛的植物基因敲除手段，該技術(shù)利用農(nóng)桿菌T-DNA介導(dǎo)轉(zhuǎn)化，將一段帶有報告基因的DNA序列整合到植物基因組DNA上，如果這段DNA插入到靶基因（待敲除基因）內(nèi)部，就會使靶基因失活。回答下列問題。
（1）使用T-DNA介導(dǎo)轉(zhuǎn)化的原因是 T-DNA能轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞，并且將其整合到該細(xì)胞的染色體DNA上T-DNA能轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞，并且將其整合到該細(xì)胞的染色體DNA上。報告基因的作用是 檢測DNA序列是否插入到靶基因中檢測DNA序列是否插入到靶基因中。
（2）T-DNA在植物基因組中會發(fā)生隨機(jī)整合，可利用PCR技術(shù)進(jìn)行鑒定。某二倍體純合植物A的某靶基因長度為900bp,利用T-DNA插入失活技術(shù)處理A植株獲得該配基因的兩種突變體B、C?，F(xiàn)將依據(jù)靶基因的兩端序列分別設(shè)計(jì)的引物1和引物2以及依據(jù)插入片段某端設(shè)計(jì)的引物3均加入PCR反應(yīng)體系，對A、B、C三種植株的靶基因進(jìn)行擴(kuò)增，電泳結(jié)果如圖所示。
①引物的作用是 使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸；依據(jù)靶基因序列設(shè)計(jì)的兩種引物之間不能堿基互補(bǔ)配對，原因是 防止引物之間結(jié)合形成雙鏈，降低引物與DNA模板鏈結(jié)合的效率防止引物之間結(jié)合形成雙鏈，降低引物與DNA模板鏈結(jié)合的效率。
②根據(jù)電泳結(jié)果分析，突變株B、C中DNA序列插入的位置 相同相同（填“相同“或“不同“）；突變株C出現(xiàn)該結(jié)果的原因是 靶基因均被敲除掉靶基因均被敲除掉。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定．
【答案】T-DNA能轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞，并且將其整合到該細(xì)胞的染色體DNA上；檢測DNA序列是否插入到靶基因中；使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸；防止引物之間結(jié)合形成雙鏈，降低引物與DNA模板鏈結(jié)合的效率；相同；靶基因均被敲除掉
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：7引用：1難度：0.6
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ?。?img alt src="http://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
2．科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）。可利用定點(diǎn)突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體，常用將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，還需用到植物細(xì)胞工程中的技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過程所依據(jù)的原理是。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增，若將一個目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為?？蒲腥藛T通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中，經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
C．人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá)，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植（克?。?，可以獲得多個具有外源基因的后代發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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