2020年中國政府提出“努力爭取2060年前實現(xiàn)碳中和”的目標(biāo)。發(fā)展利用生物能源是實現(xiàn)碳中和的有效途徑。紫蘇種子含大量油脂，出油率達(dá)35%～64%，三酰甘油（TAG）是紫蘇種子主要儲藏脂類，DGAT1是TAG合成的關(guān)鍵酶?？蒲腥藛T將紫蘇DGAT1基因?qū)胛⒃逯?，培養(yǎng)高產(chǎn)生物柴油的工程藻，如圖所示。

回答下列問題。
（1）從紫蘇組織細(xì)胞中提取總RNA時，需要加入RNA酶抑制劑，目的是

防止RNA酶降解RNA

防止RNA酶降解RNA

。將RNA逆轉(zhuǎn)錄合成的cDNA作模板，PCR擴增DGAT1基因，反應(yīng)體系中需加入

耐高溫的DNA聚合（或Taq DNA聚合）

耐高溫的DNA聚合（或Taq DNA聚合）

酶，其作用是

將游離的脫氧核苷酸連接到引物3’端，合成DNA子鏈

將游離的脫氧核苷酸連接到引物3’端，合成DNA子鏈

。為使DGAT1基因兩端分別添加BamHI和HindⅢ識別序列，可將相應(yīng)序列分別添加在兩種引物的

5′

5′

（填“5'”或“3'”）端。
（2）構(gòu)建DGAT1基因表達(dá)載體的目的是

讓目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代

讓目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代

，并且使DGAT1基因能夠表達(dá)并發(fā)揮作用。若只考慮DNA片段的兩兩連接，構(gòu)建表達(dá)載體時可得到

3

3

種大小不同的連接產(chǎn)物。利用

瓊脂糖凝膠電泳

瓊脂糖凝膠電泳

方法將不同大小的DNA片段和連接產(chǎn)物分離，再將基因表達(dá)載體分離純化導(dǎo)入微藻細(xì)胞。
（3）若鑒定微藻基因組中整合有DGAT1基因，

不能

不能

（填“能”或“不能”）說明高產(chǎn)油工程藻已生產(chǎn)成功。理由是

DGAT1基因在微藻細(xì)胞中不一定成功表達(dá)（或微藻細(xì)胞不一定產(chǎn)生TAG、微藻細(xì)胞出油率可能不高等）

DGAT1基因在微藻細(xì)胞中不一定成功表達(dá)（或微藻細(xì)胞不一定產(chǎn)生TAG、微藻細(xì)胞出油率可能不高等）

（答出1點即可）?！疤贾泻汀焙x是通過計算二氧化碳的排放總量，然后通過植樹等方式把這些排放量吸收掉。與使用石油等化石燃料相比，生產(chǎn)利用產(chǎn)油工程藻的“生物柴油”有利于實現(xiàn)碳中和，原因是

使用化石燃料只會排放CO₂，利用產(chǎn)油工程藻生產(chǎn)“生物柴油”需要吸收CO₂為原料

使用化石燃料只會排放CO₂，利用產(chǎn)油工程藻生產(chǎn)“生物柴油”需要吸收CO₂為原料

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