如圖是A基因的部分片段和載體的部分結(jié)構(gòu),科研人員欲將A基因的啟動(dòng)子連接在圖中載體中,進(jìn)而使載體上的熒光蛋白基因得到表達(dá)。圖中標(biāo)記了A基因部分片段和載體部分結(jié)構(gòu)中的限制酶切位點(diǎn)及各種限制酶識(shí)別序列及切割位點(diǎn),回答下列問(wèn)題:
(1)啟動(dòng)子是 RNA聚合概識(shí)別和結(jié)合RNA聚合概識(shí)別和結(jié)合的部位。圖中R、F表示擴(kuò)增啟動(dòng)子所用的 引物引物。
(2)已知A基因的啟動(dòng)子兩端沒(méi)有限制酶識(shí)別序列,因此可在F和R的 5'5'(填“3'”或“5'”)端分別
連接 SolI、EcoRISolI、EcoRI酶的識(shí)別序列,這兩種酶的識(shí)別序列添加位點(diǎn) 不能不能(填“能”或“不能”)交換。
(3)為完成科研人員的設(shè)想,除需使用F與R處添加的序列所對(duì)應(yīng)的酶外,擴(kuò)增啟動(dòng)子和構(gòu)建基因表達(dá)載體的過(guò)程還需用到的酶有 MunI、XhoI、TaqDNA聚合酶(耐高溫的DNA聚合酶)、DNA連接酶MunI、XhoI、TaqDNA聚合酶(耐高溫的DNA聚合酶)、DNA連接酶。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】RNA聚合概識(shí)別和結(jié)合;引物;5';SolI、EcoRI;不能;MunI、XhoI、TaqDNA聚合酶(耐高溫的DNA聚合酶)、DNA連接酶
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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