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某研究所以馬尾藻巖藻聚糖(SF)為研究對象,體外培養(yǎng)小鼠肉瘤細胞S180,做抗腫瘤活性實驗的研究。下列為部分實驗步驟與結果。
實驗步驟:
①將S180腫瘤細胞以RPMI1640為營養(yǎng)液,在5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
②將上述培養(yǎng)過的S180腫瘤細胞經酶消化,按1×103~1×105個?mL-1接種到96孔培養(yǎng)板,適宜條件下培養(yǎng)24h、48h、72h、96h后,以MTT法(又稱比色法,一種檢測細胞存活和生長的方法)于波長490nm處測定OD值,結果如圖1。
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③在適宜的培養(yǎng)條件和恰當的S180腫瘤細胞接種濃度下,研究不同濃度(0 mg?mL-1、0.1 mg?mL-1、0.5 mg?mL-1、1 mg?mL-1、2 mg?mL-1、4 mg?mL-1、8 mg?mL-1、10 mg?mL-1、15 mg?mL-1、20 mg?mL-1、25 mg?mL-1、30 mg?mL-1)的SF對S180腫瘤細胞增殖的抑制情況,96h后以MTT法于波長490nm處測定OD值,結果如圖2。
請回答下列問題:
(1)步驟①中以RPMI1640為培養(yǎng)液培養(yǎng)S180腫瘤細胞的原理是
細胞增殖
細胞增殖
。培養(yǎng)液中除細胞所需的營養(yǎng)物質之外,通常還添加一定量的
抗生素
抗生素
,以防培養(yǎng)過程中的污染。
(2)步驟②中“消化”所使用的酶是
胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)
胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)
,為減少OD值測定的誤差,應注意
多測量,取平均值
多測量,取平均值
。
(3)已知在一定細胞數目范圍內,MTT法測得的OD值與活細胞數量呈正相關,由圖1可知步驟③中恰當的S180腫瘤細胞接種濃度為
5×103
5×103
個?mL-1。
(4)圖2實驗結果表明,在一定范圍內SF濃度與細胞增殖的抑制作用呈
正相關
正相關
(填“正相關”或“負相關”),當SF濃度達到
25
25
mg?mL-1時細胞增殖的抑制作用達到極限,繼續(xù)增加SF濃度對細胞增殖的抑制作用變化不明顯。

【答案】細胞增殖;抗生素;胰蛋白酶(或膠原蛋白酶);多測量,取平均值;5×103;正相關;25
【解答】
【點評】
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