R-7是家蠶體內(nèi)的一種小分子非編碼RNA,可與某些mRNA尾端的一段非編碼序列(3'-UTR)結(jié)合,進而影響基因的表達。為研究R-7是否影響家蠶基因B(調(diào)控家蠶眼睛發(fā)育)的表達,科研人員將基因B中對應(yīng)3'-UTR的DNA片段與熒光素酶基因(R-7不影響熒光素酶基因的表達)重組,如圖1所示。將該重組載體導入家蠶胚胎細胞并檢測其表達情況,結(jié)果如圖2所示。請回答下列問題:
(1)要想短時間內(nèi)獲得大量目的基因,需要用到的技術(shù)是
PCR擴增技術(shù)
PCR擴增技術(shù)
,該技術(shù)的原理是 DNA復(fù)制
DNA復(fù)制
。
(2)圖1中對應(yīng)3'-UTR的DNA片段應(yīng)插入到位點 2
2
,原因是 目的基因應(yīng)插入到啟動子與終止子之間,且不能破壞熒光素酶基因
目的基因應(yīng)插入到啟動子與終止子之間,且不能破壞熒光素酶基因
?;蚬こ痰暮诵牟襟E是 基因表達載體的構(gòu)建
基因表達載體的構(gòu)建
、
(3)科研人員從圖②所示的實驗組和對照組細胞中提取蛋白質(zhì),經(jīng)處理檢測后獲得相對熒光值(在適宜條件下,熒光素酶可催化熒光素發(fā)生氧化反應(yīng)并發(fā)出熒光)。實驗組為將重組載體導入含R-7的家蠶胚胎細胞中,對照組1為將含有熒光素酶基因的表達載體(不含對應(yīng)3'-UTR的DNA片段)導入含R一7的家蠶胚胎細胞中,則對照組2應(yīng)為 將重組載體導入不含(或去除)R-7的家蠶胚胎細胞中
將重組載體導入不含(或去除)R-7的家蠶胚胎細胞中
。由結(jié)果推知R-7通過 與基因B所轉(zhuǎn)錄的mRNA的3'-UTR結(jié)合
與基因B所轉(zhuǎn)錄的mRNA的3'-UTR結(jié)合
進而抑制基因B的表達。