宮頸癌是女性疾病中常見的癌癥,具有很高的發(fā)病率和死亡率。研究發(fā)現(xiàn),長期高危型人乳頭瘤病毒(HPV)感染是該病的主要病因。HPV是具有雙鏈環(huán)狀DNA分子的球狀病毒,L1蛋白是其外殼蛋白的主要結(jié)構(gòu)蛋白。臨床上,抗HPV-L1蛋白單克隆抗體的制備對該病的防治和檢測具有重要意義。根據(jù)所學(xué)知識,回答下列問題:
(1)在制備L1蛋白單克隆抗體時(shí),首先將HPV-L1蛋白注入小鼠體內(nèi),該操作的目的是
使小鼠體內(nèi)產(chǎn)生Ll蛋白免疫過的B淋巴細(xì)胞
使小鼠體內(nèi)產(chǎn)生Ll蛋白免疫過的B淋巴細(xì)胞
。
(2)科研人員從上述注射過的小鼠體內(nèi)分離出脾臟,無菌環(huán)境下利用 胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)
胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)
將其分散成單個(gè)細(xì)胞,然后在特定的 選擇培養(yǎng)基
選擇培養(yǎng)基
上加入 聚乙二醇或滅活的病毒
聚乙二醇或滅活的病毒
促使脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,在該培養(yǎng)基上 未融合的親本細(xì)胞或融合的具有同種類型的細(xì)胞
未融合的親本細(xì)胞或融合的具有同種類型的細(xì)胞
都會死亡,只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長。
(3)將上述獲得的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行 克隆化培養(yǎng)和抗體檢測
克隆化培養(yǎng)和抗體檢測
,經(jīng)多次篩選,就可獲得足夠數(shù)量的具有 既能無限增殖,又能分泌抗L1蛋白抗體
既能無限增殖,又能分泌抗L1蛋白抗體
的雜交瘤細(xì)胞。
(4)噬菌體展示技術(shù)是一種將外源多肽或蛋白質(zhì)的基因與噬菌體的外殼蛋白結(jié)構(gòu)基因相結(jié)合,從而使外源多肽或蛋白展示在噬菌體表面的技術(shù)。該技術(shù)可以幫助免疫學(xué)家確定某種蛋白質(zhì)的抗原表位(抗原分子中決定抗原特異性的特殊化學(xué)基團(tuán))??蒲腥藛T利用噬菌體展示技術(shù)確定HPV-L1蛋白的抗原表位時(shí),需將L1蛋白基因插入到噬菌體外殼蛋白結(jié)構(gòu)基因的適當(dāng)位置,該過程需要 限制酶和DNA連接酶
限制酶和DNA連接酶
(填酶的名稱)。HPV-L1蛋白可以展示在噬菌體表面的理論基礎(chǔ)是 地球上的生物共用一套遺傳密碼
地球上的生物共用一套遺傳密碼
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