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土壤鹽漬化影響水稻生長發(fā)育，將水稻耐鹽堿基因OsMYB56導(dǎo)入不耐鹽堿水稻品種吉粳88中，培育耐鹽堿水稻新品種，其操作流程及可能用到的限制酶如圖，其中bar為抗除草劑基因，Tetr為四環(huán)素抗性基因，Ampr為氨芐青霉素抗性基因，①～⑦表示操作過程。
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限制酶 BamHⅠ BclⅠ SmaⅠ Sau3AⅠ
識別位點及切割位點 -G↓GATCC- -T↓GATCA- -CCC↓GGG- -↓GATC-
（1）OsMYB56基因游離的磷酸基團側(cè)為
5'
5'
（“5'”或“3'”）端，過程①PCR擴增OsMYB56基因時加入的酶催化
磷酸二酯（鍵）
磷酸二酯（鍵）
鍵的形成，還需要添加引物，應(yīng)選用引物組合
①④
①④
。
①5'-CTTGGATGAT-3'
②5'-TAAGTTGTCT-3'
③5'-TAGTAGGTTC-3'
④5'-TCTGTTGAAT-3
⑤5'-ATTCAACAGA-3'
⑥5'-ATCATCCAAG-3'
（2）根據(jù)基因表達載體的結(jié)構(gòu)組成分析，Ti質(zhì)粒中的CaMV35S是
啟動子
啟動子
，其功能是
RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，（啟動轉(zhuǎn)錄過程）
RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，（啟動轉(zhuǎn)錄過程）
?；虮磉_載體中，OsMYB56基因和bar基因編碼鏈的方向
相反
相反
（填“相同”或“相反”）。
（3）過程③應(yīng)選用限制酶
BclⅠ和SmaⅠ
BclⅠ和SmaⅠ
切割質(zhì)粒，利用所選限制酶進行操作的優(yōu)勢是
防止酶切后的質(zhì)粒自身環(huán)化，保證OsMYB56和酶切后的質(zhì)粒定向連接
防止酶切后的質(zhì)粒自身環(huán)化，保證OsMYB56和酶切后的質(zhì)粒定向連接
，切割后需要用
T4DNA連接酶
T4DNA連接酶
進行連接才能獲得重組質(zhì)粒。
（4）為了篩選出含重組質(zhì)粒的受體細胞，④過程應(yīng)在添加
四環(huán)素
四環(huán)素
的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)。培養(yǎng)后獲得的菌落不能判定是否含有重組質(zhì)粒，原因是
含未重組Ti質(zhì)粒（或普通Ti質(zhì)粒）的受體細胞也能正常生長
含未重組Ti質(zhì)粒（或普通Ti質(zhì)粒）的受體細胞也能正常生長
。

【答案】5'；磷酸二酯（鍵）；①④；啟動子；RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，（啟動轉(zhuǎn)錄過程）；相反；BclⅠ和SmaⅠ；防止酶切后的質(zhì)粒自身環(huán)化，保證OsMYB56和酶切后的質(zhì)粒定向連接；T4DNA連接酶；四環(huán)素；含未重組Ti質(zhì)粒（或普通Ti質(zhì)粒）的受體細胞也能正常生長
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/12 8:0:8組卷：15引用：5難度：0.5
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  • 1．某科研小組從土壤菌株A、B中分離到同源性為93%的Bt1抗蟲基因和Bt2抗蟲基因的編碼序列，并運用交錯延伸PCR技術(shù)獲得了抗蟲性能強的重組B基因，轉(zhuǎn)入煙草獲得成功，過程如圖所示。下列選項正確的是（　?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)
    注：①交錯延伸PCR：基因Bt1和Bt2均作為模板，所需引物相同，圖中僅示其中一條鏈的延伸情況。②啟動子Pr1a可在煙草葉肉細胞中特異性啟動基因的轉(zhuǎn)錄。③圖中生長素合成酶基因是通過成熟mRNA逆轉(zhuǎn)錄獲得的DNA片段，可使植物細胞合成生長素。

    發(fā)布：2024/11/16 21:0:1組卷：36引用：2難度：0.5

  • 2．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（　?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

  • 3．經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應(yīng)，嚴重時甚至危及生命，因此必須對食品中生物胺的含量進行減控。微生物來源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)?；a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達。
    （1）通過上述基因工程技術(shù)獲取目標產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是
     
    （填寫下列編號）。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?；a(chǎn)目標蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細胞
    ⑤目的基因和運載體重組構(gòu)建表達載體
    （2）在PCR過程中，引物的功能是
     
    。
    A．啟動DNA復(fù)制
    B．規(guī)定擴增區(qū)間
    C．解旋DNA雙鏈
    D．充當復(fù)制模板
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    （3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設(shè)計的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     
    。
    （4）獲取目的基因后，需要和載體重組導(dǎo)入受體細胞。載體的化學本質(zhì)是
     
    （填DNA或RNA/DNA或RNA）。
    （5）在常規(guī)PCR的每一輪擴增反應(yīng)中，溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    （6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質(zhì)粒pCLY15（圖丙中圖1）需用
     
    和
     
    切開，才能與MCO片段高效連接。
    （7）下列實驗操作中，能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，用合適的限制酶切割
    B．在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑，以克隆的顏色進行鑒別
    C．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，以此為模板進行PCR檢測
    D．將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5
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