如圖是利用工程菌(大腸桿菌)生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素的實(shí)驗(yàn)流程。所用的pBR322質(zhì)粒含有限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ的切點(diǎn)各一個(gè),且三種酶切割形成的末端各不相同,而Amp'表示氨芐青霉素抗性基因,Tet'表示四環(huán)素抗性基因。請(qǐng)回答以下相關(guān)問(wèn)題。
(1)②過(guò)程和④過(guò)程用的酶分別是 逆轉(zhuǎn)錄(反轉(zhuǎn)錄)酶、DNA連接酶逆轉(zhuǎn)錄(反轉(zhuǎn)錄)酶、DNA連接酶,⑤過(guò)程常用 CaCl2溶液CaCl2溶液處理大腸桿菌。
(2)將大腸桿菌培養(yǎng)在含青霉素、四環(huán)素培養(yǎng)基上的目的是 篩選含有相應(yīng)抗性基因的大腸桿菌篩選含有相應(yīng)抗性基因的大腸桿菌。
(3)如果只用限制酶PstⅠ切割目的基因和質(zhì)粒。完成過(guò)程(4)、(⑤)后(受體大腸桿菌不含Amp'、Tet'),將三角瓶?jī)?nèi)的大腸桿菌先接種到甲培養(yǎng)基上,形成菌落后用無(wú)菌牙簽挑取培養(yǎng)基甲上的單個(gè)菌落,分別接種到乙和丙兩個(gè)培養(yǎng)基的相同位置上,一段時(shí)間后,菌落的生長(zhǎng)狀況如圖乙、丙所示。接種到甲培養(yǎng)基上的目的是篩選 含四環(huán)素抗性基因含四環(huán)素抗性基因的大腸桿菌;接種到培養(yǎng)基乙上的大腸桿菌菌落,能存活的大腸桿菌體內(nèi)導(dǎo)入的是 完整的pBR322質(zhì)粒(或含有Amp'、Tet'的質(zhì)粒)完整的pBR322質(zhì)粒(或含有Amp'、Tet'的質(zhì)粒)。含有目的基因的大腸桿菌在培養(yǎng)基乙和丙上的生存情況是 在丙中能存活,在乙中不能存活在丙中能存活,在乙中不能存活。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】逆轉(zhuǎn)錄(反轉(zhuǎn)錄)酶、DNA連接酶;CaCl2溶液;篩選含有相應(yīng)抗性基因的大腸桿菌;含四環(huán)素抗性基因;完整的pBR322質(zhì)粒(或含有Amp'、Tet'的質(zhì)粒);在丙中能存活,在乙中不能存活
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:14引用:1難度:0.6
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