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目前基因工程所用的質(zhì)粒載體主要是以天然細菌質(zhì)粒的各種元件為基礎(chǔ)重新組建的人工質(zhì)粒,pBR322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體,其主要結(jié)構(gòu)如圖一所示.

(1)構(gòu)建人工質(zhì)粒時要有抗性基因,以便于
篩選(鑒別目的基因是否導(dǎo)入受體細胞)
篩選(鑒別目的基因是否導(dǎo)入受體細胞)

(2)pBR32Z分子中有單個EcoRI限制酶作用位點,EcoR 1只能識別序列一GAATTC一,并只能在G與A之間切割.若在某目的基因的兩側(cè)各有1個EcoRI的切點,請畫出目的基因兩側(cè)被限制酶EcoRI切割后所形成的黏性末端.

(3)pBR322分子中另有單個的BamHI限制酶作用位點,現(xiàn)將經(jīng)BamHI處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶BgIⅡ處理得到的目的基因,通過DNA連接酶作用恢復(fù)鍵,成功的獲得了重組質(zhì)粒.說明
限制酶BamHⅠ和限制酶BglⅡ的酶切產(chǎn)物具有相同末端
限制酶BamHⅠ和限制酶BglⅡ的酶切產(chǎn)物具有相同末端

(4)為了檢測上述重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入原本無ampR和tetR的大腸桿菌,將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖二的菌落.再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上,使絨布面沾上菌落,然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖三的結(jié)果(空圈表示與圖二對照無菌落的位置).與圖三空圈相對應(yīng)的圖二中的菌落表現(xiàn)型是
能抗氨芐青霉素,但不能抗四環(huán)素
能抗氨芐青霉素,但不能抗四環(huán)素
,圖三結(jié)果顯示,多數(shù)大腸桿菌導(dǎo)入的是
既能抗氨芐青霉素,又能抗四環(huán)素的pBR322質(zhì)粒
既能抗氨芐青霉素,又能抗四環(huán)素的pBR322質(zhì)粒

【答案】篩選(鑒別目的基因是否導(dǎo)入受體細胞);;限制酶BamHⅠ和限制酶BglⅡ的酶切產(chǎn)物具有相同末端;能抗氨芐青霉素,但不能抗四環(huán)素;既能抗氨芐青霉素,又能抗四環(huán)素的pBR322質(zhì)粒
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:17引用:5難度:0.5
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  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括
     
     
    。
    (2)生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
  • 3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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