用DNA重組技術(shù)可以賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人類需要的生物產(chǎn)品。在此過程中需要使用多種工具酶，其中4種限制性核酸內(nèi)切酶的切割位點(diǎn)如圖所示。
回答下列問題：
（1）常用的DNA連接酶有E.coliDNA連接酶和T4DNA連接酶。上圖中 EcoRI、PstIEcoRI、PstI酶切割后的DNA片段可以用E.coliDNA連接酶連接。上圖中 EcoRI、PstI、SmaI和EcoRVEcoRI、PstI、SmaI和EcoRV酶切割后的DNA片段可以用T4DNA連接酶連接。
（2）DNA連接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間形成的化學(xué)鍵是 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵。
（3）DNA重組技術(shù)中所用的質(zhì)粒載體具有一些特征，如質(zhì)粒DNA分子上有復(fù)制原點(diǎn)，可以保證質(zhì)粒在受體細(xì)胞中能 自我復(fù)制自我復(fù)制；質(zhì)粒DNA分子上有 一至多個(gè)限制酶切位點(diǎn)一至多個(gè)限制酶切位點(diǎn)，便于外源DNA插入；質(zhì)粒DNA分子上有標(biāo)記基因（如某種抗生素抗性基因），利用抗生素可篩選出含質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞，方法是 用含有該抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)宿主細(xì)胞，能夠存活的即為含有質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞用含有該抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)宿主細(xì)胞，能夠存活的即為含有質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞。
圖甲是含有目的基因的外源DNA片段，圖乙是用于將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的質(zhì)粒（陰影部分表示抗生素抗性基因），相關(guān)限制酶作用部位如圖，現(xiàn)想培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因抗病植株
（4）在基因工程操作中，不宜選用Sma1，原因是其會(huì)破壞 目的基因目的基因和 標(biāo)記基因標(biāo)記基因。
（5）在基因工程操作中，不宜選用EcoRⅠ，原因是用其切割外源DNA片段后，不能將目的基因切割下來不能將目的基因切割下來。
（6）為避免目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化以及目的基因的反向連接，可使用不同的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，例如可以選用 EcoR1EcoR1和 Pst1Pst1這兩種酶。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】EcoRI、PstI；EcoRI、PstI、SmaI和EcoRV；磷酸二酯鍵；自我復(fù)制；一至多個(gè)限制酶切位點(diǎn)；用含有該抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)宿主細(xì)胞，能夠存活的即為含有質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞；目的基因；標(biāo)記基因；不能將目的基因切割下來；EcoR1；Pst1
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：15引用：1難度：0.5
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1．紅細(xì)胞生成素（EPO）是人體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然 EPO來源極為有限，某科研團(tuán)隊(duì)采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器，使其能合成EPO。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)。現(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是（ ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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