為探究M基因的功能,科研人員將克隆得到的M基因?qū)霐M南芥植株(自交繁殖),流程如圖所示?;卮鹣铝袉栴}:
(1)根據(jù)圖中過程a、b,寫出獲得大量M基因的大致方法:以mRNA為模板,利用反轉(zhuǎn)錄法(逆轉(zhuǎn)錄法)合成DNA(M基因)片段,再利用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增M基因以mRNA為模板,利用反轉(zhuǎn)錄法(逆轉(zhuǎn)錄法)合成DNA(M基因)片段,再利用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增M基因。
(2)過程d將重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌,通常需要用 Ca2+Ca2+處理農(nóng)桿菌。過程e在擬南芥植株產(chǎn)生大量花序時(shí),將其花表面部分置于農(nóng)桿菌懸浮液中浸泡20~30s,3~4周后得到轉(zhuǎn)化擬南芥植株的種子T0,這就是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化,轉(zhuǎn)化是指 目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。使用T-DNA介導(dǎo)轉(zhuǎn)化的原因是 T-DNA能轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞,并整合到該細(xì)胞的染色體DNA上T-DNA能轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞,并整合到該細(xì)胞的染色體DNA上。
(3)將收獲的擬南芥種子T0播種在含有 卡那霉素卡那霉素的培養(yǎng)基上,能健康生長的幼苗可確定含有M(目的)基因。若采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得的擬南芥細(xì)胞中只有一條DNA上含有M基因,則要進(jìn)一步獲得M基因穩(wěn)定的突變體,下一步操作是 將T0植株連續(xù)自交,篩選出能穩(wěn)定遺傳的突變體將T0植株連續(xù)自交,篩選出能穩(wěn)定遺傳的突變體(選擇最簡便的方法)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】以mRNA為模板,利用反轉(zhuǎn)錄法(逆轉(zhuǎn)錄法)合成DNA(M基因)片段,再利用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增M基因;Ca2+;目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程;T-DNA能轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞,并整合到該細(xì)胞的染色體DNA上;卡那霉素;將T0植株連續(xù)自交,篩選出能穩(wěn)定遺傳的突變體
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:15引用:3難度:0.5
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