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自然界中某些細(xì)菌可通過代謝將原油轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定無害的終產(chǎn)物,科學(xué)家為獲得能有效修復(fù)原油污染土壤的工程菌展開了相關(guān)研究。
(1)獲得能降解原油的目標(biāo)菌可從
被原油污染的土壤
被原油污染的土壤
取樣,樣品經(jīng)
無菌水
無菌水
(填“無菌水”或“蒸餾水”)稀釋后涂布于以原油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng),分離純化后獲得目標(biāo)菌A。
(2)目標(biāo)菌A成膜性差,不能有效控制原油向深層土壤滲透。研究人員將假單胞菌的bdlA基因(約1300bp)導(dǎo)入目標(biāo)菌A體內(nèi),嘗試構(gòu)建成膜性好的工程菌。
①假單胞菌遭受環(huán)境壓力時,會分泌大量胞外復(fù)合物將自身包裹于其中形成細(xì)菌聚集膜樣物(生物被膜),體現(xiàn)了生物對環(huán)境的
適應(yīng)
適應(yīng)

②圖1為bdlA基因與pX系列質(zhì)粒連接構(gòu)建的重組質(zhì)粒模式圖,為初步檢測構(gòu)建是否成功,可選用限制酶
Csp45I、XbaI
Csp45I、XbaI
對其切制,并對酶切產(chǎn)物及重組質(zhì)粒進(jìn)行凝膠電泳檢測,可初步判斷重組質(zhì)粒構(gòu)建成功。
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(3)將上述方法獲得的兩種工程菌命名為KT2和KT5,在不同時間測定實驗組中工程菌及對照組中
導(dǎo)入普通質(zhì)粒的目標(biāo)菌A
導(dǎo)入普通質(zhì)粒的目標(biāo)菌A
的生物被膜總量相對值,結(jié)果如圖2所示。該結(jié)果表明
在36t/h時KT2和KT5兩種工程菌的生物被膜總量相對值顯著提高
在36t/h時KT2和KT5兩種工程菌的生物被膜總量相對值顯著提高

(4)若要將以上工程菌用于原油污染土壤的修復(fù),舉例說明下一步應(yīng)進(jìn)行的研究:
如何擴(kuò)大培養(yǎng)、比較不同工程菌降解原油的效率、對生態(tài)環(huán)境的影響等
如何擴(kuò)大培養(yǎng)、比較不同工程菌降解原油的效率、對生態(tài)環(huán)境的影響等
(舉一例即可)。

【答案】被原油污染的土壤;無菌水;適應(yīng);Csp45I、XbaI;導(dǎo)入普通質(zhì)粒的目標(biāo)菌A;在36t/h時KT2和KT5兩種工程菌的生物被膜總量相對值顯著提高;如何擴(kuò)大培養(yǎng)、比較不同工程菌降解原油的效率、對生態(tài)環(huán)境的影響等
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:10引用:1難度:0.6
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    發(fā)布:2024/11/14 7:0:1組卷:62引用:7難度:0.7
  • 2.經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應(yīng),嚴(yán)重時甚至危及生命,因此必須對食品中生物胺的含量進(jìn)行減控。微生物來源的多銅氧化酶(MCO)能高效分解生物胺,基于基因工程規(guī)?;a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因,然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達(dá)。
    (1)通過上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物,涉及如下步驟,則合理的操作步驟排序是
     
    (填寫下列編號)。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細(xì)胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)模化生產(chǎn)目標(biāo)蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
    ⑤目的基因和運載體重組構(gòu)建表達(dá)載體
    (2)在PCR過程中,引物的功能是
     
    。
    A.啟動DNA復(fù)制
    B.規(guī)定擴(kuò)增區(qū)間
    C.解旋DNA雙鏈
    D.充當(dāng)復(fù)制模板
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    (3)為獲得目的基因MCO(圖甲灰色表示的序列),正確設(shè)計的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     
    。
    (4)獲取目的基因后,需要和載體重組導(dǎo)入受體細(xì)胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是
     
    (填DNA或RNA/DNA或RNA)。
    (5)在常規(guī)PCR的每一輪擴(kuò)增反應(yīng)中,溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    (6)若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端,那么載體質(zhì)粒pCLY15(圖丙中圖1)需用
     
     
    切開,才能與MCO片段高效連接。
    (7)下列實驗操作中,能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,用合適的限制酶切割
    B.在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑,以克隆的顏色進(jìn)行鑒別
    C.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,以此為模板進(jìn)行PCR檢測
    D.將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc(四環(huán)素)的平板上,根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布:2024/11/14 4:30:2組卷:29引用:3難度:0.5
  • 3.用限制酶EcoRⅤ單獨切割某普通質(zhì)粒,可產(chǎn)生14kb(1kb即1000個堿基對)的長鏈,而同時用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒,可得到三種長度的DNA片段,見圖(其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個黏性末端)。
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    若用MboⅠ限制酶單獨切割該普通質(zhì)粒,則產(chǎn)生的DNA片段的長度為( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/14 4:0:2組卷:89引用:9難度:0.7
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