自然界中某些細(xì)菌可通過代謝將原油轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定無害的終產(chǎn)物,科學(xué)家為獲得能有效修復(fù)原油污染土壤的工程菌展開了相關(guān)研究。
(1)獲得能降解原油的目標(biāo)菌可從 被原油污染的土壤被原油污染的土壤取樣,樣品經(jīng) 無菌水無菌水(填“無菌水”或“蒸餾水”)稀釋后涂布于以原油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng),分離純化后獲得目標(biāo)菌A。
(2)目標(biāo)菌A成膜性差,不能有效控制原油向深層土壤滲透。研究人員將假單胞菌的bdlA基因(約1300bp)導(dǎo)入目標(biāo)菌A體內(nèi),嘗試構(gòu)建成膜性好的工程菌。
①假單胞菌遭受環(huán)境壓力時(shí),會分泌大量胞外復(fù)合物將自身包裹于其中形成細(xì)菌聚集膜樣物(生物被膜),體現(xiàn)了生物對環(huán)境的 適應(yīng)適應(yīng)。
②圖1為bdlA基因與pX系列質(zhì)粒連接構(gòu)建的重組質(zhì)粒模式圖,為初步檢測構(gòu)建是否成功,可選用限制酶 Csp45I、XbaICsp45I、XbaI對其切制,并對酶切產(chǎn)物及重組質(zhì)粒進(jìn)行凝膠電泳檢測,可初步判斷重組質(zhì)粒構(gòu)建成功。
(3)將上述方法獲得的兩種工程菌命名為KT2和KT5,在不同時(shí)間測定實(shí)驗(yàn)組中工程菌及對照組中 導(dǎo)入普通質(zhì)粒的目標(biāo)菌A導(dǎo)入普通質(zhì)粒的目標(biāo)菌A的生物被膜總量相對值,結(jié)果如圖2所示。該結(jié)果表明 在36t/h時(shí)KT2和KT5兩種工程菌的生物被膜總量相對值顯著提高在36t/h時(shí)KT2和KT5兩種工程菌的生物被膜總量相對值顯著提高。
(4)若要將以上工程菌用于原油污染土壤的修復(fù),舉例說明下一步應(yīng)進(jìn)行的研究:如何擴(kuò)大培養(yǎng)、比較不同工程菌降解原油的效率、對生態(tài)環(huán)境的影響等如何擴(kuò)大培養(yǎng)、比較不同工程菌降解原油的效率、對生態(tài)環(huán)境的影響等(舉一例即可)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】被原油污染的土壤;無菌水;適應(yīng);Csp45I、XbaI;導(dǎo)入普通質(zhì)粒的目標(biāo)菌A;在36t/h時(shí)KT2和KT5兩種工程菌的生物被膜總量相對值顯著提高;如何擴(kuò)大培養(yǎng)、比較不同工程菌降解原油的效率、對生態(tài)環(huán)境的影響等
【解答】
【點(diǎn)評】
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