埃博拉病毒(EBoV)衣殼外有包膜,包膜上有多種棘突蛋白,其中GP蛋白最為關(guān)鍵,能被宿主細(xì)胞識(shí)別。如圖為制備抗埃博拉病毒單克隆抗體的過(guò)程?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)制備抗埃博拉病毒單克隆抗體時(shí),需要用滅活的EBoV對(duì)小鼠進(jìn)行多次注射的目的是 刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多已免疫的B淋巴細(xì)胞(細(xì)胞A)刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多已免疫的B淋巴細(xì)胞(細(xì)胞A)。
(2)細(xì)胞融合的原理是 細(xì)胞膜具有(一定的)流動(dòng)性細(xì)胞膜具有(一定的)流動(dòng)性。誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合常用的方法除了電融合和 聚乙二醇(PEG)誘導(dǎo)法聚乙二醇(PEG)誘導(dǎo)法外,還可以用滅活的病毒進(jìn)行誘導(dǎo)。
(3)單克隆抗體制備過(guò)程中要經(jīng)過(guò)兩次篩選。第一次篩選出雜交瘤細(xì)胞,再對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行 克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),經(jīng)多次篩選后可獲得足夠數(shù)量的單克隆抗體。篩選后單克隆抗體具備的特點(diǎn)是 既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生(抗埃博拉病毒的)單一抗體既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生(抗埃博拉病毒的)單一抗體。
(4)體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)種類要齊全,比例要合適,此外為補(bǔ)充細(xì)胞生長(zhǎng)所需的未知營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)還需要添加 血清血清。獲得的單克隆抗體最終可以從 小鼠腹水或培養(yǎng)液小鼠腹水或培養(yǎng)液中提取。
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多已免疫的B淋巴細(xì)胞(細(xì)胞A);細(xì)胞膜具有(一定的)流動(dòng)性;聚乙二醇(PEG)誘導(dǎo)法;克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè);既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生(抗埃博拉病毒的)單一抗體;血清;小鼠腹水或培養(yǎng)液
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:3引用:1難度:0.6
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1.為實(shí)現(xiàn)對(duì)肝癌的有效治療,研究人員通過(guò)比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點(diǎn),制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
(1)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)。CLDN6蛋白是一個(gè)跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時(shí),應(yīng)提取
(2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
(3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無(wú)關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞,檢測(cè)細(xì)胞活力,結(jié)果如圖1:
由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞,依據(jù)是
(4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機(jī)制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6 -
2.為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用,某研究團(tuán)隊(duì)對(duì)鼠源單克隆抗體F進(jìn)行改造,制備了人—鼠嵌合抗體F′,具體流程為:提取鼠源雜交瘤細(xì)胞RNA,逆轉(zhuǎn)錄后通過(guò)PCR擴(kuò)增抗體F的基因序列,將其部分序列用人的相應(yīng)抗體基因序列進(jìn)行替換,再構(gòu)建表達(dá)載體,在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測(cè)抗體性質(zhì),他們測(cè)定了F′單獨(dú)與抗原作用時(shí)對(duì)抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時(shí)與抗原作用(F′與F初始濃度相同)時(shí)F′對(duì)抗原的結(jié)合能力,結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202304/369/62ee43c5.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布:2024/12/19 1:0:1組卷:39引用:4難度:0.5 -
3.2020年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予發(fā)現(xiàn)丙肝病毒的三位科學(xué)家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化,部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。如圖為利用小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料研制丙肝病毒的單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)流程。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?br />
發(fā)布:2024/12/19 6:0:1組卷:42引用:2難度:0.6
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