科研人員構(gòu)建了可表達(dá)H-M3融合蛋白的重組質(zhì)粒并進(jìn)行了檢測(cè)，該質(zhì)粒的部分結(jié)構(gòu)如圖所示，其中M3編碼序列表達(dá)標(biāo)簽短肽M3。
（1）圖中啟動(dòng)子的作用是 RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄。除圖中標(biāo)出的結(jié)構(gòu)外，作為載體，質(zhì)粒還需具備的結(jié)構(gòu)有 限制酶切割位點(diǎn)、標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn)等限制酶切割位點(diǎn)、標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn)等（答出兩點(diǎn)即可）。構(gòu)建重組質(zhì)粒需要使用T4DNA連接酶，下列屬于T4DNA連接酶底物的是 ②④②④。
（2）構(gòu)建重組質(zhì)粒后，為了確定H基因連接到質(zhì)粒中且插入方向正確，需進(jìn)行PCR檢測(cè)，若僅用一對(duì)引物，應(yīng)選擇圖中的 F1和R2F1和R2，添加引物的原因是 DNA聚合酶不能從頭合成DNA，只能從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸DNA聚合酶不能從頭合成DNA，只能從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸。
（3）若H基因?yàn)樗阁w內(nèi)的綠色熒光蛋白基因，科研人員將構(gòu)建的表達(dá)載體導(dǎo)入大腸，結(jié)果發(fā)現(xiàn)大腸桿菌有的發(fā)綠色熒光，有的發(fā)黃色熒光，有的不發(fā)熒光。將發(fā)黃色熒光的大腸桿菌分離純化后，對(duì)H基因進(jìn)行測(cè)序，發(fā)現(xiàn)其堿基序列發(fā)生改變，將該基因命名為H1基因（黃色熒光蛋白基因）。若要通過基因工程的方法探究H1基因能否在真核細(xì)胞中表達(dá)，實(shí)驗(yàn)思路是 將構(gòu)建的含HI基因的表達(dá)載體導(dǎo)入酵母菌中，檢測(cè)酵母菌是否能發(fā)黃色熒光將構(gòu)建的含HI基因的表達(dá)載體導(dǎo)入酵母菌中，檢測(cè)酵母菌是否能發(fā)黃色熒光。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄；限制酶切割位點(diǎn)、標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn)等；②④；F1和R2；DNA聚合酶不能從頭合成DNA，只能從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸；將構(gòu)建的含HI基因的表達(dá)載體導(dǎo)入酵母菌中，檢測(cè)酵母菌是否能發(fā)黃色熒光
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/7/15 8:0:9組卷：6引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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