如圖表示獲得抗除草劑轉(zhuǎn)基因玉米的培育過程,圖中的報告基因只能在真核生物中正確表達(dá),其產(chǎn)物能使某種能被細(xì)胞吸收的無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。請回答以下問題:
(1)構(gòu)建重組質(zhì)粒是基因工程的核心,此過程通常需要
限制性核酸內(nèi)切酶#限制酶
限制性核酸內(nèi)切酶#限制酶
和DNA連接酶等工具酶。Ti質(zhì)粒是農(nóng)桿菌中的一種質(zhì)粒,其上有一段包含報告基因的T-DNA序列,因該片段能進(jìn)入植物細(xì)胞并 整合到染色體(DNA)上或細(xì)胞核內(nèi)
整合到染色體(DNA)上或細(xì)胞核內(nèi)
,從而使其攜帶的目的基因的遺傳遵循孟德爾定律。
(2)圖中篩選1的目的是 獲得含有重組質(zhì)粒(或目的基因)的農(nóng)桿菌
獲得含有重組質(zhì)粒(或目的基因)的農(nóng)桿菌
。農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化愈傷組織的過程中,愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌,會導(dǎo)致未轉(zhuǎn)化的愈傷組織可能在含除草劑的培養(yǎng)基中生長。因此,進(jìn)行篩選2時,應(yīng)在培養(yǎng)基中加 除草劑和物質(zhì)K
除草劑和物質(zhì)K
,并挑選 細(xì)胞內(nèi)呈顯藍(lán)色
細(xì)胞內(nèi)呈顯藍(lán)色
的愈傷組織細(xì)胞,用于植物組織培養(yǎng)。
(3)將單個轉(zhuǎn)化的愈傷組織細(xì)胞置于適當(dāng)?shù)囊后w培養(yǎng)基中,經(jīng)過適當(dāng)配比的 營養(yǎng)物質(zhì)和生長調(diào)節(jié)劑
營養(yǎng)物質(zhì)和生長調(diào)節(jié)劑
誘導(dǎo),可發(fā)育成胚狀體,最后發(fā)育成完整的植株。此過程始終要在適宜溫度、適宜培養(yǎng)基及 無菌或光照
無菌或光照
等條件下進(jìn)行。