研究人員利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法和花粉管通道法培育出轉(zhuǎn)抗寒基因PgLCBF1的月季石榴，主要過(guò)程示意圖如圖。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。
（1）質(zhì)粒pBI121的復(fù)制原點(diǎn)中A-T比例高，有利于 解旋解旋。過(guò)程①用限制酶XbaⅠ分別切割質(zhì)粒和抗寒基因，原因是 形成相同的黏性末端，便于將目的基因插入到質(zhì)粒特定部位形成相同的黏性末端，便于將目的基因插入到質(zhì)粒特定部位。
（2）過(guò)程②篩選時(shí)，應(yīng)將菌液用 稀釋涂布平板稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)，使用的培養(yǎng)基除水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源和生長(zhǎng)因子外，還應(yīng)加入的物質(zhì)有 瓊脂、新霉素瓊脂、新霉素。實(shí)驗(yàn)中過(guò)程③擴(kuò)大培養(yǎng)的主要目的是 轉(zhuǎn)基因大腸桿菌快速增殖，獲得更多的重組質(zhì)粒（或獲得更多的重組質(zhì)粒）轉(zhuǎn)基因大腸桿菌快速增殖，獲得更多的重組質(zhì)粒（或獲得更多的重組質(zhì)粒）。
（3）轉(zhuǎn)基因農(nóng)桿菌借助萌發(fā)的花粉管運(yùn)輸，將PgLCBF1導(dǎo)入 受精卵受精卵中，最終獲得轉(zhuǎn)基因種子，經(jīng)播種、篩選出抗寒月季石榴新品種。與農(nóng)桿菌直接轉(zhuǎn)化月季石榴葉肉細(xì)胞相比，花粉管通道轉(zhuǎn)化法具有的優(yōu)點(diǎn)有 操作簡(jiǎn)單、直接，不需要經(jīng)過(guò)植物組織培養(yǎng)，轉(zhuǎn)化成功后可直接獲得種子操作簡(jiǎn)單、直接，不需要經(jīng)過(guò)植物組織培養(yǎng)，轉(zhuǎn)化成功后可直接獲得種子。
（4）為探究上述農(nóng)桿菌菌液侵染的合適介質(zhì)和時(shí)期，研究人員進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)完成下表。
| 實(shí)驗(yàn)步驟 | 簡(jiǎn)要操作過(guò)程 |
| 采集花粉 | 摘取花粉成熟的月季石榴花，自然陰干，收集花粉 |
| 配制不同介質(zhì) | 配制植物組織培養(yǎng)液（MS）、質(zhì)量濃度為5%蔗糖溶液、MS+5%蔗糖混合溶液 |
| 配制農(nóng)桿菌侵染液 | 取5mL轉(zhuǎn)基因農(nóng)桿菌菌液，分別與① 等量的上述不同介質(zhì)（植物組織培養(yǎng)液（MS）、質(zhì)量濃度為5%蔗糖溶液、MS+5%蔗糖混合溶液） 等量的上述不同介質(zhì)（植物組織培養(yǎng)液（MS）、質(zhì)量濃度為5%蔗糖溶液、MS+5%蔗糖混合溶液） 混勻 |
| ② 人工授粉 人工授粉 |
蘸取收集好的花粉，輕輕點(diǎn)涂在花柱的柱頭上 |
| 侵染轉(zhuǎn)化 | 分別在授粉時(shí)和授粉后24h,選擇柱頭未開(kāi)裂的花，③ 用等量不同的農(nóng)桿菌侵染液涂抹傳粉后的月季石榴花柱頭 用等量不同的農(nóng)桿菌侵染液涂抹傳粉后的月季石榴花柱頭 并作標(biāo)記，每個(gè)處理侵染10朵花。 |
| 結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析 | 分組獲得月季石榴種子，催芽播種、培植植株，統(tǒng)計(jì)坐果率、種子出芽率和轉(zhuǎn)化陽(yáng)性率。（坐果率=坐果數(shù)/侵染花數(shù)×100%；出芽率=出芽數(shù)/播種數(shù)×100%；轉(zhuǎn)化陽(yáng)性率=轉(zhuǎn)化成功的株數(shù)/播種數(shù)×100%）。 |
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】解旋；形成相同的黏性末端，便于將目的基因插入到質(zhì)粒特定部位；稀釋涂布平板；瓊脂、新霉素；轉(zhuǎn)基因大腸桿菌快速增殖，獲得更多的重組質(zhì)粒（或獲得更多的重組質(zhì)粒）；受精卵；操作簡(jiǎn)單、直接，不需要經(jīng)過(guò)植物組織培養(yǎng)，轉(zhuǎn)化成功后可直接獲得種子；等量的上述不同介質(zhì)（植物組織培養(yǎng)液（MS）、質(zhì)量濃度為5%蔗糖溶液、MS+5%蔗糖混合溶液）；人工授粉；用等量不同的農(nóng)桿菌侵染液涂抹傳粉后的月季石榴花柱頭
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：21引用：1難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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