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新冠mRNA疫苗是一種全新的疫苗研發(fā)技術(shù),其原理是將編碼抗原蛋白(S 蛋白)的mRNA直接注入人體,進一步翻譯出S蛋白,誘導免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答,而只有蛋白質(zhì)的病毒是沒有侵染能力的。同時,mRNA在人體使用過后會被分解,不會整合逃人體基因組?;卮鹣铝袉栴}:
(1)滅活疫苗是最傳統(tǒng)經(jīng)典的生產(chǎn)技術(shù),即在體外培養(yǎng)新冠病毒,經(jīng)過
滅活、減毒
滅活、減毒
處理使其失去致病性,注入人體后可以刺激人體產(chǎn)生抗體和
記憶細胞
記憶細胞
。 其優(yōu)點是制備方法簡單,但滅活可能對病毒抗原有一定影響導致作用效果低,且研發(fā)上市周期較長。
(2)某實驗室快速制備新冠mRNA疫苗的部分過程如下,請分析補充有關(guān)內(nèi)容:
①提取新冠病毒的RNA,利用RT--PCR技術(shù)以編碼S蛋白的RNA片段為模板合成cDNA,催化該過程的酶是
逆轉(zhuǎn)錄酶
逆轉(zhuǎn)錄酶
。PCR過程需要根據(jù)
S蛋白基因的已知的部分核苷酸序列
S蛋白基因的已知的部分核苷酸序列
設(shè)計引物。為便于后續(xù)的剪切和連接,應(yīng)該在2種引物的5'端分別加上
兩種不同的限制性酶切位點
兩種不同的限制性酶切位點

②將擴增得到的cDNA與質(zhì)粒連接構(gòu)建成重組DNA,再導入大腸桿菌。此過程中通常選用兩種不同的限制酶切割的原因是
防止目的基因自連、防止質(zhì)粒自身環(huán)化、保證目的基因與載體正確連接
防止目的基因自連、防止質(zhì)粒自身環(huán)化、保證目的基因與載體正確連接
(至少寫出2條)。
③利用細菌的快速繁殖,經(jīng)過提取、分離純化等工藝獲得大量由S蛋白的DNA轉(zhuǎn)錄得到的
mRNA
mRNA
,因其單獨存在時結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定,包裹一層脂類最終制成新冠mRNA疫苗。
(3)理論上,與滅活疫苗相比,mRNA疫苗的優(yōu)點是
安全性高、效果好、產(chǎn)量高、一般不會產(chǎn)生毒性、研發(fā)速度快、上市周期短、病毒變異容易修改核酸序列
安全性高、效果好、產(chǎn)量高、一般不會產(chǎn)生毒性、研發(fā)速度快、上市周期短、病毒變異容易修改核酸序列
。

【答案】滅活、減毒;記憶細胞;逆轉(zhuǎn)錄酶;S蛋白基因的已知的部分核苷酸序列;兩種不同的限制性酶切位點;防止目的基因自連、防止質(zhì)粒自身環(huán)化、保證目的基因與載體正確連接;mRNA;安全性高、效果好、產(chǎn)量高、一般不會產(chǎn)生毒性、研發(fā)速度快、上市周期短、病毒變異容易修改核酸序列
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:15引用:1難度:0.6
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  • 1.PCR是利用體內(nèi)DNA復制的原理,進行生物體外復制特定 DNA片段的核酸合成技術(shù)。請回答有關(guān)問題:菁優(yōu)網(wǎng)
    (1)PCR反應(yīng)的基本步驟是變性、
     
    、
     
    。
    (2)科學家研究發(fā)現(xiàn) DNA聚合酶只能催化
     
    方向的聚合反應(yīng)。圖1表示細胞內(nèi)染色體 DNA的半保留復制過程,有一條子鏈是先合成短的DNA片段(稱為岡崎片段),再形成較長的分子,可推測參與以上過程的酶有DNA聚合酶、
     
    、
     
    。在PCR過程中無岡崎片段形成,原因是細胞內(nèi)染色體 DNA的復制過程特點是
     
    ,PCR過程的特點是
     
    。
    (3)雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)與脫氧核苷三磷酸(dNTP)的結(jié)構(gòu)如圖2所示。已知 ddNTP按堿基互補配對的方式加到正在復制的子鏈中后,子鏈的延伸立即終止。現(xiàn)有一些序列為5'-GCCTAAGATCGCA-3'的DNA分子單鏈片段,通過PCR技術(shù)獲得以堿基“C”為末端(3'為堿基C)不同長度的子鏈DNA片段,將以上子鏈 DNA片段進行電泳分離可得到
     
    種不同長度的子鏈 DNA片段。為使實驗順利進行,在PCR反應(yīng)管中除了單鏈模板、引物、DNA 聚合酶和相應(yīng)的緩沖液等物質(zhì)外,還需要加入下列哪組原料
     

    A.dGTP,dATP,dTTP
    B.dGTP、dATP、dTTP、dCTP、ddCTP
    C.dGTP,dATP,dTTP,dCTP
    D.ddGTP,ddATP,ddTTP,ddCTP
    (4)如圖3為形成單鏈DNA后,再進行PCR擴增示意圖。
    菁優(yōu)網(wǎng)
    催化①過程的酶是
     
    ;核酸酶H的作用是
     
    。如果某RNA單鏈中一共有80個堿基,其中C有15個,A與U之和占該鏈堿基含量的40%,經(jīng)過以上若干過程后共獲得8個雙鏈 DNA,此過程中至少需加入G參與組成的核苷酸數(shù)量為
     
    (以上過程不考慮引物)。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:19引用:1難度:0.7
  • 2.原位PCR技術(shù)是利用原位PCR儀,在組織或細胞中靶DNA所在的位置上進行的PCR循環(huán)擴增,通過摻入標記基因直接顯色或結(jié)合原位雜交進行檢測的方法。進行擴增時,反應(yīng)體系中的反應(yīng)成分需滲透到組織或細胞的靶DNA處才能進行擴增。PCR反應(yīng)體系中需要添加一定濃度的Mg2+,而組織細胞間的物質(zhì)會吸附Mg2+,使進入細胞的Mg2+減少。下列說法正確的是(  )

    發(fā)布:2024/10/31 21:0:2組卷:10引用:3難度:0.7
  • 3.在新冠病毒的核酸檢測過程中采用的逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR),是聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)的廣泛應(yīng)用。在RT-PCR中,一條RNA鏈被逆轉(zhuǎn)錄成互補DNA,再以此為模板通過PCR進行DNA擴增,進而獲得檢測的目的基因S。下列關(guān)于RT-PCR的敘述錯誤的是(  )

    發(fā)布:2024/10/31 0:0:1組卷:4引用:1難度:0.6
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