β-珠蛋白是哺乳動物血紅蛋白的重要組成成分當(dāng)它成分異常時,動物可能會患貧血癥。現(xiàn)利用基因工程改造大腸桿菌,生產(chǎn)出β-珠蛋白如圖表示所用的質(zhì)粒以及酶切位點,已知質(zhì)粒的總長為3.8kb(1kb=1000堿基對),其中的lacZ基因表達(dá)能使白色的大腸桿菌菌落呈現(xiàn)藍(lán)色。回答下列問題:
(1)質(zhì)粒通過BamHⅠ切割后,含有 EcoRⅠ切割位點的DNA長度為3.33.3kb.利用BamHⅠ和BglⅡ分別切割目的基因的兩端,再將其與BamHⅠ切割后的質(zhì)粒結(jié)合時,需要加入DNA連接DNA連接酶,以構(gòu)成重組質(zhì)粒。在目的基因與質(zhì)粒結(jié)合時,質(zhì)粒上BamHⅠ切割位點與目的基因某一端的BglⅡ切割位點能結(jié)合的原因是BamHⅠ和BglⅡ切割能夠產(chǎn)生相同的黏性末端BamHⅠ和BglⅡ切割能夠產(chǎn)生相同的黏性末端。
(2)若上述的重組質(zhì)粒長度為4.65kb,則酶切后的目的基因長度為1.351.35kb.根據(jù)重組質(zhì)粒經(jīng)BamHⅠ和EcoRⅠ共同切割后的產(chǎn)物不同,可將重組質(zhì)粒分為兩種類型。若其中的一種可以獲得2個長度分別為1.5kb和3.15kb的DNA片段,則另一種重組質(zhì)粒通過BamHⅠ和EcoRⅠ共同切割后,獲得的2個DNA片段長度分別為1.8和2.851.8和2.85kb。
(3)將原始質(zhì)粒和重組質(zhì)粒分別導(dǎo)入大腸桿菌,則菌落顏色為白白色的受體菌可能會產(chǎn)生β-珠蛋白。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】3.3;DNA連接;BamHⅠ和BglⅡ切割能夠產(chǎn)生相同的黏性末端;1.35;1.8和2.85;白
【解答】
【點評】
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