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回答下列有關(guān)遺傳信息傳遞與表達(dá)的問(wèn)題。
野生型大腸桿菌(E.coli)具有完整的LacZ基因,該基因編碼的β-半乳糖苷酶由α片段和ω片段兩部分組成,兩部分均存在時(shí)可將無(wú)色化合物X-gal“切割”成半乳糖和深藍(lán)色的物質(zhì)5-溴-4-靛藍(lán),從而使整個(gè)菌落變?yōu)樗{(lán)色。DH5α是基因工程中常用的一種大腸桿菌誘變菌株,對(duì)氨芐青霉素敏感,其LacZ基因中編碼ω片段的序列仍然保留,但編碼α片段的序列缺失。
(1)LacZ基因控制β-半乳糖苷酶合成的過(guò)程主要包括
轉(zhuǎn)錄
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兩個(gè)環(huán)節(jié)。
(2)某研究小組構(gòu)建了質(zhì)粒pXY-1,如圖甲所示,該質(zhì)粒含氨芐青霉素抗性基因Ampr和編碼大腸桿菌β-半乳糖苷酶α片段的基因片段LacZ。圖乙顯示的則是NasⅠ、HpaⅡ和KasⅠ三種限制酶的識(shí)別序列(↓表示切割位點(diǎn))。若以該質(zhì)粒作為運(yùn)載體,將外源目的基因(圖丙)導(dǎo)入大腸桿菌DH5α菌株,在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)應(yīng)選用的限制酶是
KasKasⅠ
KasKasⅠ
。此外,還需用到的另一種酶是
DNA連接酶
DNA連接酶

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(3)(不定項(xiàng))若用含有氨芐青霉素和X-gal的固體培養(yǎng)基篩選導(dǎo)入了pXY-1質(zhì)粒的DH5α大腸桿菌,下列說(shuō)法正確的是
BC
BC
。
A.沒(méi)有導(dǎo)入任何質(zhì)粒的DH5α大腸桿菌可以在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)且菌落為白色
B.導(dǎo)入了pXY-1空載體質(zhì)粒的DH5α大腸桿菌可以在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)且菌落為藍(lán)色
C.導(dǎo)入了pXY-1重組質(zhì)粒的DH5α大腸桿菌可以在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)且菌落為白色
D.導(dǎo)入了pXY-1重組質(zhì)粒的DH5α大腸桿菌可以在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)且菌落為藍(lán)色
(4)現(xiàn)從(3)中的固體培養(yǎng)基平板上挑取一個(gè)重組菌落,經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)后提取質(zhì)粒,分別用不同的限制酶處理并對(duì)酶切產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,結(jié)果如表所示:
所用限制性內(nèi)切酶 所得條帶長(zhǎng)度
BamHⅠ、ScaⅠ雙酶切 1230bp、2770bp
HpaⅡ、ScaⅠ雙酶切 460bp、1240bp、xbp
據(jù)此可知,目的基因全長(zhǎng)為
900
900
bp,在其內(nèi)部存在
HpaHpaⅡ
HpaHpaⅡ
(填限制酶名稱)的切割位點(diǎn),表中字母x代表的數(shù)值應(yīng)為
2300
2300
。

【答案】轉(zhuǎn)錄;翻譯;KasKasⅠ;DNA連接酶;BC;900;HpaHpaⅡ;2300
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書(shū)面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/7/9 8:0:8組卷:2引用:1難度:0.6
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  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是(  )

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
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  • 3.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉?wèn)題:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括
     
     
    。
    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí),解開(kāi)DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí),使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的
     

    (3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶,常見(jiàn)的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒(méi)有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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