干燥綜合征（SS）是臨床常見(jiàn)的一種自身免疫病，其血清中存在多種抗體，其中以SSB抗體異性最強(qiáng)，影響最顯著?？蒲腥藛T為建立抗SSB抗體全自動(dòng)定量檢測(cè)的磁微?；瘜W(xué)發(fā)光試劑，利用基因工程技術(shù)獲得重組SSB蛋白，流程如圖，請(qǐng)分析回答：
（1）利用RNA通過(guò)①過(guò)程獲得cDNA需要 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄酶。通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增SSB基因的前提是要測(cè)定該基因兩端部分核苷酸序列，目的是 便于合成引物便于合成引物。
（2）為確保與PET41a質(zhì)粒定向連接，獲得的SSB基因兩端要含有 BamHI和XhoⅠBamHI和XhoⅠ酶切位點(diǎn)。在PCR過(guò)程中，第 三三輪循環(huán)產(chǎn)物中出現(xiàn)含所需限制酶的片段A。
（3）獲得含SSB基因的重組質(zhì)粒后，進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)切割原質(zhì)粒和重組質(zhì)粒，獲得片段大小如下表（1kb=1000堿基對(duì)）（注意：DNA片段大小與圖中所畫(huà)比例一致）。SSB基因的長(zhǎng)度為 3kb3kb。
| 限制酶 | EcoRⅠ | BamHⅠ和XhoⅠ |
| 原質(zhì)粒 | 8.1kb | 2.7kb、5.4kb |
| 重組質(zhì)粒 | 3.4kb、5.0kb | 未做該處理 |
卡那霉素
卡那霉素
的培養(yǎng)基上，收集菌落進(jìn)行鑒定，將陽(yáng)性菌落進(jìn)一步純化后將菌體破碎處理，篩選得到重組SSB蛋白。（5）為檢測(cè)重組質(zhì)粒表達(dá)情況及重組蛋白與抗體結(jié)合能力，科研人員通過(guò)注射含純化的重組SSB蛋白的弗氏佐劑進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)完成下表：
| 實(shí)驗(yàn)步驟 | 實(shí)驗(yàn)操作 |
| 分組 | 取健康、生理狀態(tài)相同的小鼠隨機(jī)均分成兩組。 |
| 實(shí)驗(yàn)處理 | 實(shí)驗(yàn)組注射含純化的重組SSB蛋白的弗氏佐劑，對(duì)照組① 注射等量不含重組SSB蛋白的弗氏佐劑 注射等量不含重組SSB蛋白的弗氏佐劑 ，連續(xù)三次。 |
| 飼養(yǎng) | 在相同且適宜環(huán)境中飼養(yǎng)。 |
| ② 檢測(cè)（獲取實(shí)驗(yàn)結(jié)果） 檢測(cè)（獲取實(shí)驗(yàn)結(jié)果） |
第三次免疫后第七天取小鼠血清并提取抗體進(jìn)行檢測(cè)。 |
| 結(jié)果分析 | 與對(duì)照組相比，若抗體檢測(cè)呈③ 陽(yáng)性 陽(yáng)性 ，則表明重組SSB蛋白具有與相應(yīng)抗體高度結(jié)合的能力。 |
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄；便于合成引物；BamHI和XhoⅠ；三；3kb；卡那霉素；注射等量不含重組SSB蛋白的弗氏佐劑；檢測(cè)（獲取實(shí)驗(yàn)結(jié)果）；陽(yáng)性
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：24引用：1難度：0.5
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
2．煙草是我國(guó)一些地區(qū)的經(jīng)濟(jì)作物之一，提高煙草質(zhì)量有利于提高經(jīng)濟(jì)收入。我國(guó)科研團(tuán)隊(duì)研究了一種轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種，抗鹽基因的結(jié)構(gòu)和獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過(guò)程（①～⑤）如圖所示。回答下列問(wèn)題：
（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過(guò)程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過(guò)程（填序號(hào)）。過(guò)程②③采用的方法是。
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3．如表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)。現(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說(shuō)法正確的是（ ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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