CD47是一種免疫抑制蛋白，腫瘤細(xì)胞通過過量表達(dá)CD47抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用以實(shí)現(xiàn)免疫逃逸?？笴D47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，其制備流程如圖甲所示。
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（1）制備過程中需要用CD47對(duì)小鼠進(jìn)行多次處理，目的是

獲得較多的已免疫（對(duì)CD47產(chǎn)生免疫）的B淋巴細(xì)胞

獲得較多的已免疫（對(duì)CD47產(chǎn)生免疫）的B淋巴細(xì)胞

。為保證細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境無菌、無毒，需要進(jìn)行的相關(guān)操作是

對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理；保證在無菌環(huán)境下進(jìn)行操作；定期更換培養(yǎng)液

對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理；保證在無菌環(huán)境下進(jìn)行操作；定期更換培養(yǎng)液

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（2）圖乙表示核苷酸合成的兩條途徑，物質(zhì)A可以阻斷全合成途徑，轉(zhuǎn)化酶和激酶是補(bǔ)救合成途徑所必需的兩種酶。正常細(xì)胞中含有轉(zhuǎn)化酶和激酶，骨髓瘤細(xì)胞中缺乏轉(zhuǎn)化酶。已知圖甲的篩選1利用的是加入了H、A、T三種物質(zhì)的“HAT培養(yǎng)基”，其篩選得到是

雜交瘤

雜交瘤

細(xì)胞，該細(xì)胞能在HAT培養(yǎng)基中存活并增殖的原因是

HAT培養(yǎng)基中的物質(zhì)A阻斷了全合成途徑，雜交瘤細(xì)胞含有從B細(xì)胞獲得的轉(zhuǎn)化酶和激酶，可以通過補(bǔ)救合成途徑來合成核苷酸，同時(shí)又具備骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖的特性，因此能在HAT培養(yǎng)基中存活和增殖

HAT培養(yǎng)基中的物質(zhì)A阻斷了全合成途徑，雜交瘤細(xì)胞含有從B細(xì)胞獲得的轉(zhuǎn)化酶和激酶，可以通過補(bǔ)救合成途徑來合成核苷酸，同時(shí)又具備骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖的特性，因此能在HAT培養(yǎng)基中存活和增殖

；經(jīng)篩選2獲得的細(xì)胞的特點(diǎn)是

既能大量增殖又能產(chǎn)生抗CD47的抗體

既能大量增殖又能產(chǎn)生抗CD47的抗體

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（3）為驗(yàn)證抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，研究人員設(shè)計(jì)如下實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)組：將抗CD47的單克隆抗體加入巨噬細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的共培養(yǎng)系中，檢測(cè)巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)（與被吞噬腫瘤細(xì)胞的比例呈正相關(guān)）；對(duì)照組為

不加單克隆抗體的巨噬細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的共培養(yǎng)系

不加單克隆抗體的巨噬細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的共培養(yǎng)系

，預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

對(duì)照組巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)顯著低于實(shí)驗(yàn)組

對(duì)照組巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)顯著低于實(shí)驗(yàn)組

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