以我國科學(xué)家為主的科研團隊將OSNL(即4個基因Oct4/Sox2/Nanog/Lin28A的縮寫)導(dǎo)入黑羽雞胚成纖維細胞(CEFs),誘導(dǎo)其重編程為誘導(dǎo)多能干細胞(iPS),再誘導(dǎo)iPS分化為誘導(dǎo)原始生殖細胞(iPGCs),然后將iPGCs注射到孵化2.5天的白羽雞胚血管中,最終獲得具有黑羽雞遺傳特性的后代,實驗流程如圖?;卮鹣铝袉栴}。
(1)CEFs是從孵化9天的黑羽雞胚中分離獲得的,為了獲得單細胞懸液,雞胚組織剪碎后需用 胰蛋白酶、膠原蛋白酶胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理。動物細胞培養(yǎng)通常需要在合成培養(yǎng)基中添加 動物血清動物血清等天然成分,以滿足細胞對某些細胞因子的需求。
(2)體外獲取OSNL的方法有 PCR技術(shù)PCR技術(shù)(答出1種即可)。若要在CEFs中表達外源基因的蛋白,需構(gòu)建基因表達載體,載體中除含有目的基因和標記基因外,還須有啟動子和 終止子終止子等。啟動子是 RNA聚合酶RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,有了它才能驅(qū)動 目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終表達出所需要的蛋白質(zhì)目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終表達出所需要的蛋白質(zhì)。
(3)iPS細胞和iPGCs細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能不同的根本原因是 基因的選擇性表達基因的選擇性表達。
(4)該實驗流程中用到的生物技術(shù)有 基因工程、動物細胞培養(yǎng)等基因工程、動物細胞培養(yǎng)等(答出1點即可)。
【答案】胰蛋白酶、膠原蛋白酶;動物血清;PCR技術(shù);終止子;RNA聚合酶;目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終表達出所需要的蛋白質(zhì);基因的選擇性表達;基因工程、動物細胞培養(yǎng)等
【解答】
【點評】
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