進(jìn)行乙肝疫苗的注射,可以有效地預(yù)防乙肝的發(fā)病。如圖為“乙肝基因工程疫苗”的生產(chǎn)和使用過程圖解,質(zhì)粒上箭頭所指部位為相應(yīng)的限制酶的切割位點(diǎn)。質(zhì)粒中l(wèi)acZ基因可使細(xì)菌利用加入培養(yǎng)基的物質(zhì)X-gal,使菌落顯現(xiàn)出藍(lán)色;若無(wú)該基因,菌落則顯現(xiàn)出白色。請(qǐng)回答下列問題:
(1)在基因工程中使用的基本工具除載體外,還有 限制限制酶和 DNA連接DNA連接酶。
(2)為了制備乙肝疫苗,可以通過基因工程技術(shù)生產(chǎn)?;蚬こ痰幕静僮髁鞒淌?目的基因的獲取→基因表達(dá)載體的構(gòu)建→將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞→目的基因以及目的基因表達(dá)的檢測(cè)鑒定。目的基因的獲取→基因表達(dá)載體的構(gòu)建→將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞→目的基因以及目的基因表達(dá)的檢測(cè)鑒定。(用文字和箭頭表示)。
(3)據(jù)圖分析構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),切割含有目的基因的DNA片段不宜使用EcoRⅤ酶,原因是 用EcoRⅤ酶切割會(huì)破壞青霉素抗性基因,影響篩選用EcoRⅤ酶切割會(huì)破壞青霉素抗性基因,影響篩選。
(4)篩選轉(zhuǎn)基因成功的大腸桿菌,需要在培養(yǎng)液中加入 青霉素青霉素和 X-galX-gal;如果出現(xiàn)白菌落,說明基因表達(dá)載體成功轉(zhuǎn)入大腸桿菌,解釋重組質(zhì)粒中l(wèi)acZ基因不存在的原因是 構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)應(yīng)該選用限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ進(jìn)行切割,這樣會(huì)破壞lacZ基因構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)應(yīng)該選用限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ進(jìn)行切割,這樣會(huì)破壞lacZ基因。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】限制;DNA連接;目的基因的獲取→基因表達(dá)載體的構(gòu)建→將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞→目的基因以及目的基因表達(dá)的檢測(cè)鑒定。;用EcoRⅤ酶切割會(huì)破壞青霉素抗性基因,影響篩選;青霉素;X-gal;構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)應(yīng)該選用限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ進(jìn)行切割,這樣會(huì)破壞lacZ基因
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:1引用:1難度:0.7
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