IKK激酶山IKKα、IKKβ和IKKγ三種亞基組成，該酶參與動物體內(nèi)免疫細(xì)胞的分化。臨床上發(fā)現(xiàn)某重癥聯(lián)合免疫缺陷（SCID）患兒的IKKβ基因編碼區(qū)第1183位堿基T突變?yōu)镃。為研究該患兒發(fā)病機(jī)制，研究人員應(yīng)用大引物PCR定點誘變技術(shù)獲得突變基因，并培育出SCID模型小鼠。圖1為定點誘變獲得突變基因的過程。
（1）在定點誘變獲取突變基因時，PCR1中使用的引物有 引物A、引物C引物A、引物C，PCR中使用的引物有 引物B、大引物b引物B、大引物b。PCR1和PCR2不能在同一個反應(yīng)體系中進(jìn)行，原因是 引物之間能結(jié)合，會干擾引物和模板鏈的結(jié)合，影響PCR過程引物之間能結(jié)合，會干擾引物和模板鏈的結(jié)合，影響PCR過程。
（2）PCR在第一個循環(huán)之前通常將DNA樣品加熱至95℃數(shù)分鐘進(jìn)行預(yù)變性處理，其目的是 增加大分子模板DNA徹底變性的概率增加大分子模板DNA徹底變性的概率。由于大引物較長，含C與G的堿基較多，為減少非目標(biāo)基因的獲得，在PCR2復(fù)性過程中應(yīng)采取的措施是 適當(dāng)提高退火溫度適當(dāng)提高退火溫度。
（3）培育模型鼠的過程中，需用限制酶SacI、HindⅢ對突變基因和載體進(jìn)行雙酶切，雙酶切的優(yōu)點是 防止質(zhì)粒和目的基因的自身環(huán)化及反向連接防止質(zhì)粒和目的基因的自身環(huán)化及反向連接。研究人員經(jīng)鑒定、篩選獲得一只轉(zhuǎn)基因雜合鼠HE，讓HE與野生鼠雜交得F1，F(xiàn)1雌雄鼠隨機(jī)交配得F2。對F2中純合野生鼠WT、純合突變鼠HO、雜合鼠HE三種小鼠胸腺淋巴細(xì)胞中組成IKK激酶的三種亞基進(jìn)行提純和電泳，結(jié)果如圖2。據(jù)此結(jié)果推測SCID患者免疫缺陷產(chǎn)生的機(jī)制是 IKKβ基因突變導(dǎo)致IKKβ含量減少，IKK激酶活力降低，不利于免疫細(xì)胞的分化IKKβ基因突變導(dǎo)致IKKβ含量減少，IKK激酶活力降低，不利于免疫細(xì)胞的分化。
【答案】引物A、引物C；引物B、大引物b；引物之間能結(jié)合，會干擾引物和模板鏈的結(jié)合，影響PCR過程；增加大分子模板DNA徹底變性的概率；適當(dāng)提高退火溫度；防止質(zhì)粒和目的基因的自身環(huán)化及反向連接；IKKβ基因突變導(dǎo)致IKKβ含量減少，IKK激酶活力降低，不利于免疫細(xì)胞的分化
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/5/13 8:0:8組卷：36引用：3難度：0.5
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1．科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術(shù)屬于（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）?？衫枚c突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體，常用將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，還需用到植物細(xì)胞工程中的技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過程所依據(jù)的原理是。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增，若將一個目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為?？蒲腥藛T通過實驗研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中，經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因為這種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
C．人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá)，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植（克?。?，可以獲得多個具有外源基因的后代發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
2．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：4引用：3難度：0.7
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