為使水稻獲得抗除草劑性狀，科研人員將除草劑草甘膦抗性基因轉入水稻植株，獲得抗草甘膦轉基因水稻。
注：GUS基因表達產物經染色能從無色變成藍色
（1）將草甘膦抗性基因作為目的基因目的基因，與Ti質粒用相同的限制性核酸內切酶限制性核酸內切酶和DNA連接酶處理構建基因表達載體。
（2）用CaCl2CaCl2處理農桿菌后獲得感受態(tài)細胞，將其與基因表達載體混合完成轉化后，在添加潮霉素潮霉素的培養(yǎng)基中，經篩選1得到含基因表達載體的農桿菌。
（3）取某品種水稻的幼胚，先進行消毒消毒處理，然后接種到培養(yǎng)基中，水稻幼胚細胞發(fā)生脫分化脫分化形成愈傷組織。用含基因表達載體的農桿菌侵染該愈傷組織。
（4）利用PCR技術，可以鑒定被侵染的愈傷組織中是否含有草甘膦抗性基因。草甘膦抗性基因的部分序列如下：
5’---ATGGCT………AGGAAC---3’
3’---TACCGA………TCCTTG---5’
根據上述序列應選擇引物BDBD（填字母）進行PCR。
A．引物：5’-TACCGA-3’
B．引物：5’-GTTCCT-3’
C．引物：5’-AUGGCU-3’
D．引物：5’-ATGGCT-3’
（5）除了鑒定愈傷組織中是否含有目的基因以外，還可以利用GUS基因表達產物的鑒定進行圖中的篩選2，以確定目的基因是否表達表達。兩次篩選后得到的轉基因愈傷組織經過細胞的再分化再分化過程，獲得轉基因水稻。
（6）為獲得具有抗除草劑性狀的轉基因水稻，還需要在個體水平進行抗性測試。請你設計一個實驗方案，篩選出對草甘膦具有抗性的轉基因水稻。選取長勢相同的野生型和轉基因水稻；用等量相同濃度的草甘膦農藥噴灑；相同環(huán)境條件下培養(yǎng)一段時間后；觀測水稻的生長情況選取長勢相同的野生型和轉基因水稻；用等量相同濃度的草甘膦農藥噴灑；相同環(huán)境條件下培養(yǎng)一段時間后；觀測水稻的生長情況。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】目的基因；限制性核酸內切酶；CaCl2；潮霉素；消毒；脫分化；BD；表達；再分化；選取長勢相同的野生型和轉基因水稻；用等量相同濃度的草甘膦農藥噴灑；相同環(huán)境條件下培養(yǎng)一段時間后；觀測水稻的生長情況
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：114引用：2難度：0.7
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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