科研人員將寒帶地區(qū)海魚體內(nèi)的抗凍基因?qū)肭ъㄒ环N番茄品種）細胞，成功培育出抗凍千禧果。如圖為培育過程中使用的Ti質(zhì)粒示意圖，其中Vir區(qū)的基因活化能促進T-DNA的加工和轉(zhuǎn)移?；卮鹣铝袉栴}：
（1）將抗凍基因的mRNA逆轉(zhuǎn)錄后，再進行PCR可獲得抗凍基因，該過程中所需要的酶是 逆轉(zhuǎn)錄酶、TaqDNA聚合酶或耐高溫的DNA聚合酶逆轉(zhuǎn)錄酶、TaqDNA聚合酶或耐高溫的DNA聚合酶。每次PCR循環(huán)分為3步，其中所需溫度最低的一步稱為 復性復性，PCR擴增抗凍基因時需要添加特異性引物，目的是 使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。
（2）抗凍基因不能直接導入受體細胞，需要構(gòu)建抗凍基因表達載體。構(gòu)建抗凍基因表達載體的目的是 有利于抗凍基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并遺傳給下一代；有利于抗凍基因在受體細胞中表達和發(fā)揮作用有利于抗凍基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并遺傳給下一代；有利于抗凍基因在受體細胞中表達和發(fā)揮作用（答出1點）。
（3）選擇圖中Ti質(zhì)粒構(gòu)建基因表達載體時，不能選擇限制酶Ⅱ切割Ti質(zhì)粒，原因是 限制酶Ⅱ會破壞Vir區(qū)的基因，影響目的基因的轉(zhuǎn)移限制酶Ⅱ會破壞Vir區(qū)的基因，影響目的基因的轉(zhuǎn)移，最好選擇限制酶 ⅢⅢ構(gòu)建基因表達載體。
（4）為篩選成功導入抗凍基因的千禧果細胞，最好在培養(yǎng)基中添加 四環(huán)素四環(huán)素。將成功轉(zhuǎn)化的千禧果細胞誘導培育成植株，最后在 低溫（或寒冷）低溫（或寒冷）條件下篩選出具有抗凍性狀的千禧果植株。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶、TaqDNA聚合酶或耐高溫的DNA聚合酶；復性；使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸；有利于抗凍基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并遺傳給下一代；有利于抗凍基因在受體細胞中表達和發(fā)揮作用；限制酶Ⅱ會破壞Vir區(qū)的基因，影響目的基因的轉(zhuǎn)移；Ⅲ；四環(huán)素；低溫（或寒冷）
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/7/3 8:0:9組卷：2引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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