重疊延伸PCR技術(shù)是常規(guī)PCR技術(shù)的衍生，它依據(jù)需要連接的基因中核苷酸序列（或基因片段）設(shè)計出多對具有互補末端的引物，先分段對模板進行擴增，再將PCR產(chǎn)物混合，其中的重疊鏈將相互搭橋、互為模板而延伸，最終實現(xiàn)不同來源的擴增片段重疊拼接起來的目的，如圖1所示。請分析并回答下列問題：
（1）圖1中的過程②在 22個反應(yīng)體系中進行，原因是 引物互補影響PCR結(jié)果引物互補影響PCR結(jié)果。經(jīng)過程②后，體系中存在不同長度的DNA片段，獲取所需DNA的方法是 瓊脂糖凝膠電泳分離瓊脂糖凝膠電泳分離。①中引物2和引物3的游離部分分別與 外顯子B、外顯子A外顯子B、外顯子A的部分序列同源。
（2）圖1中的過程⑥不需要不需要（填“需要”或“不需要”）另加引物，原因是 兩條DNA的交錯部分即可作為其延伸的引物兩條DNA的交錯部分即可作為其延伸的引物。進行②⑥⑧⑩過程時，需要在一定的緩沖溶液中進行，⑩過程除圖示條件還需要加入 四種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶四種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶。
（3）重疊延伸PCR技術(shù)可用于基因的定點突變。基因定點突變是根據(jù)目的基因（如圖2蛋白A基因）的序列，設(shè)計4條單鏈核苷酸片段為引物（圖2中的引物A→D），原理是取引物A、B進行PCR1反應(yīng)，以及引物C、D進行PCR2反應(yīng)，然后將需要的兩個片段混合、延伸并大量擴增。圖2引物B和引物C中的“∧”代表 突變堿基突變堿基，引物B和引物C堿基序列間存在的關(guān)系是 互補互補。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定；目的基因的篩選與獲取．
【答案】2；引物互補影響PCR結(jié)果；瓊脂糖凝膠電泳分離；外顯子B、外顯子A；不需要；兩條DNA的交錯部分即可作為其延伸的引物；四種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶；突變堿基；互補
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：23引用：2難度：0.7
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
2．科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術(shù)屬于（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）?？衫枚c突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體，常用將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，還需用到植物細(xì)胞工程中的技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過程所依據(jù)的原理是。利用PCR技術(shù)擴增，若將一個目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為。科研人員通過實驗研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中，經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因為這種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
C．人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá)，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進行核移植（克隆），可以獲得多個具有外源基因的后代發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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