某種質(zhì)粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶切割位點,它們的識別序列和黏性末端各不相同,該質(zhì)粒同時含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因??茖W(xué)家利用此質(zhì)粒培育轉(zhuǎn)基因抗鹽作物,提高糧食種植面積取得重大進(jìn)展。其培育過程如甲圖,請回答下列問題。
(1)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時,應(yīng)選用
SalⅠ、HindⅢ
SalⅠ、HindⅢ
兩種酶對質(zhì)粒和含抗鹽基因的DNA進(jìn)行切割,以保證重組質(zhì)粒序列的唯一性。
(2)基因工程中的檢測篩選是一個重要的步驟。為篩選出導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌,乙圖表示運用影印培養(yǎng)法(使一系列培養(yǎng)皿的相同位置上能出現(xiàn)相同菌落的一種接種培養(yǎng)方法)檢測重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入了土壤農(nóng)桿菌。
培養(yǎng)基除了含有土壤農(nóng)桿菌生長繁殖必需的成分和瓊脂外,培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分別還要含有氨芐青霉素
氨芐青霉素
、四環(huán)素(氨芐青霉素和四環(huán)素)
四環(huán)素(氨芐青霉素和四環(huán)素)
。從檢測篩選的結(jié)果分析,含有目的基因的是4和6
4和6
(填數(shù)字)菌落中的細(xì)菌。
(3)為了確定抗鹽作物是否培育成功,要用放射性同位素
放射性同位素
標(biāo)記的含抗鹽基因的DNA片段作探針進(jìn)行分子雜交檢測,還要從個體水平用一定濃度的鹽水澆灌煙草植株(將作物移栽到鹽堿地中種植)
一定濃度的鹽水澆灌煙草植株(將作物移栽到鹽堿地中種植)
(方法)鑒定作物的耐鹽性。
(4)將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的工程細(xì)胞培育成完整植株需要用組織培養(yǎng)技術(shù),組織培養(yǎng)技術(shù)依據(jù)的原理是細(xì)胞的全能性
細(xì)胞的全能性
。
(5)將抗鹽基因?qū)胱魑锛?xì)胞內(nèi),使作物具有了抗鹽性狀,這種變異類型屬于基因重組
基因重組
。