外泌體是細胞分泌的一種微小囊泡,其中可含有蛋白質、mRNA、DNA片段等生物活性物質。科研人員對外泌體在乳腺癌細胞間耐藥信息的傳遞方式進行了相關研究。
(1)獲得乳腺癌細胞阿霉素耐藥株MA,并提取其外泌體AE,將AE與乳腺癌細胞阿霉素敏感株M共培養(yǎng)12h,測定阿霉素對乳腺癌細胞增殖的影響,實驗結果如圖1所示。
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①可利用熒光標記或同位素示蹤熒光標記或同位素示蹤技術示蹤AE的去向。
②AE可以被M細胞攝取,此過程依賴于細胞膜的流動性細胞膜的流動性。
③比較三組實驗結果,初步說明AE可向M傳遞耐藥信息,一定程度提高了M細胞對阿霉素的耐藥性AE可向M傳遞耐藥信息,一定程度提高了M細胞對阿霉素的耐藥性。
(2)研究發(fā)現(xiàn)多耐藥基因(MDR)表達產(chǎn)物是P-gp,該蛋白有ATP依賴性載體蛋白活性,可將藥物(阿霉素)通過主動運輸主動運輸方式轉運至細胞外,使細胞具有耐藥性。
(3)檢測發(fā)現(xiàn)M+AE共培養(yǎng)后的M株P-gp表達量提高,為探究其原因,科研人員進行了相關研究,結果如圖2和圖3所示。已知P-gp半衰期(降解50%所需要的時間)約為14~17h。
實驗結果否定了外泌體僅通過攜帶P-gp的方式傳遞耐藥信息,判斷依據(jù)是P-gp半衰期為14~17h,72h時AE攜帶的P-gp幾乎完全降解,但M+AE組的P-gp仍顯著高于M組P-gp半衰期為14~17h,72h時AE攜帶的P-gp幾乎完全降解,但M+AE組的P-gp仍顯著高于M組。推測可能的其他方式是外泌體通過攜帶MDR的mRNA的方式傳遞耐藥信息外泌體通過攜帶MDR的mRNA的方式傳遞耐藥信息。
(4)下列關于外泌體的敘述正確的是ABCABC。
A.可參與細胞間通訊 B.可實現(xiàn)基因跨細胞表達 C.可望成為藥物載體 D.不能存在于細胞內(nèi)液中。
【答案】熒光標記或同位素示蹤;細胞膜的流動性;AE可向M傳遞耐藥信息,一定程度提高了M細胞對阿霉素的耐藥性;主動運輸;P-gp半衰期為14~17h,72h時AE攜帶的P-gp幾乎完全降解,但M+AE組的P-gp仍顯著高于M組;外泌體通過攜帶MDR的mRNA的方式傳遞耐藥信息;ABC
【解答】
【點評】
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