[選修3:現(xiàn)代生物科技專題]
新冠病毒是一種RNA病毒,感染率極高,由其引起的新冠肺炎在我國累計(jì)確診已超過400萬例。病毒的檢測在疫情防控中發(fā)揮重要作用。回答下列問題:
(1)核酸檢測是篩查新冠病毒感染的重要方法。通過采集咽拭子等樣本,利用RT-PCR法擴(kuò)增病毒核酸,原理是以病毒ORFIab基因和N基因(核糖核苷酸序列)中的保守序列為靶點(diǎn),將RNA經(jīng)過 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄過程合成cDNA,再擴(kuò)增相應(yīng)的核酸片段。
(2)RT-PCR法僅擴(kuò)增ORFIab基因和N基因兩種片段,則PCR反應(yīng)體系中共需要加入 44種引物。加入的引物需要滿足 耐高溫、能與模板鏈相結(jié)合耐高溫、能與模板鏈相結(jié)合的特點(diǎn)。
(3)病毒抗原檢測是早期診斷感染者的重要措施,病毒N蛋白是引發(fā)機(jī)體產(chǎn)生抗體的主要抗原。若利用N蛋白制備單克隆抗體,則需要用N蛋白免疫小鼠,目的是獲得獲得能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞獲得能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞。
(4)制備單克隆抗體過程中,細(xì)胞融合后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞外,融合的細(xì)胞有 B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成的細(xì)胞B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成的細(xì)胞三種類型。經(jīng)過篩選、檢測,體外培養(yǎng)收集單克隆抗體并制成檢測試劑盒。
(5)與常規(guī)的血清抗體檢測相比,用單克隆抗體檢測的顯著優(yōu)勢是 雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的單克隆抗體能準(zhǔn)確地識別抗原的細(xì)微差異,與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,并且可以大量制備雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的單克隆抗體能準(zhǔn)確地識別抗原的細(xì)微差異,與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,并且可以大量制備(答出兩點(diǎn))等。
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用;DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定.
【答案】逆轉(zhuǎn)錄;4;耐高溫、能與模板鏈相結(jié)合;獲得能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞;B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成的細(xì)胞;雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的單克隆抗體能準(zhǔn)確地識別抗原的細(xì)微差異,與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,并且可以大量制備
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:5引用:1難度:0.5
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1.為實(shí)現(xiàn)對肝癌的有效治療,研究人員通過比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點(diǎn),制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
(1)檢測發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)。CLDN6蛋白是一個跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時(shí),應(yīng)提取
(2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
(3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞,檢測細(xì)胞活力,結(jié)果如圖1:
由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞,依據(jù)是
(4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機(jī)制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6 -
2.為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用,某研究團(tuán)隊(duì)對鼠源單克隆抗體F進(jìn)行改造,制備了人—鼠嵌合抗體F′,具體流程為:提取鼠源雜交瘤細(xì)胞RNA,逆轉(zhuǎn)錄后通過PCR擴(kuò)增抗體F的基因序列,將其部分序列用人的相應(yīng)抗體基因序列進(jìn)行替換,再構(gòu)建表達(dá)載體,在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測抗體性質(zhì),他們測定了F′單獨(dú)與抗原作用時(shí)對抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時(shí)與抗原作用(F′與F初始濃度相同)時(shí)F′對抗原的結(jié)合能力,結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯誤的是( ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="http://img.jyeoo.net/quiz/images/202304/369/62ee43c5.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布:2024/12/19 1:0:1組卷:39引用:4難度:0.5 -
3.2020年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎授予發(fā)現(xiàn)丙肝病毒的三位科學(xué)家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化,部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。如圖為利用小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料研制丙肝病毒的單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)流程。下列敘述錯誤的是( )
發(fā)布:2024/12/19 6:0:1組卷:42引用:2難度:0.6
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