2020年諾貝爾化學(xué)獎授予兩位在CRISPR-Cas9基因編輯方面做出了突出貢獻(xiàn)的女科學(xué)家。CRISPR是規(guī)律間隔性成簇短回文重復(fù)序列的簡稱,Cas9指的CRISPR相關(guān)蛋白9,是進(jìn)行DNA切割的酶的名字。CRISPR-Cas9具有切割其他類型細(xì)胞中DNA序列的潛力,可對生物的DNA序列進(jìn)行修剪、切斷、替換或添加。它作為基因組“編輯器”在全球數(shù)千個實(shí)驗(yàn)室中得到廣泛應(yīng)用。如圖是某實(shí)驗(yàn)室將編輯好的人胰島素基因入大腸桿菌時所用的載體質(zhì)粒。請回答問題:
(1)研究發(fā)現(xiàn)CRISPR-Cas9系統(tǒng)廣泛存在于細(xì)菌細(xì)胞內(nèi),推測該系統(tǒng)在細(xì)胞內(nèi)的作用是切割外源DNA,保護(hù)自身切割外源DNA,保護(hù)自身。
(2)Cas9在基因編輯過程中所起的作用是內(nèi)切酶的作用(切開DNA雙鏈)內(nèi)切酶的作用(切開DNA雙鏈),編輯后的基因應(yīng)該插入甲載體的位點(diǎn)22,甲載體中的熒光素酶基因的作用是標(biāo)記基因(便于檢測是否成功導(dǎo)入質(zhì)粒)標(biāo)記基因(便于檢測是否成功導(dǎo)入質(zhì)粒)。
(3)在基因工程過程中可利用PCR技術(shù)對編輯后的目的基因進(jìn)行大量擴(kuò)增,它利用的是DNA半保留復(fù)制DNA半保留復(fù)制的原理,擴(kuò)增時通常需要在引物的5′5′端添加相應(yīng)的酶切位點(diǎn),經(jīng)過n輪擴(kuò)增,理論上至少需要的引物數(shù)量為2n+1-22n+1-2。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】切割外源DNA,保護(hù)自身;內(nèi)切酶的作用(切開DNA雙鏈);2;標(biāo)記基因(便于檢測是否成功導(dǎo)入質(zhì)粒);DNA半保留復(fù)制;5′;2n+1-2
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:50引用:1難度:0.6
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