B基因存在于水稻基因組中,其僅在體細胞(2n)和精子中正常表達,但在卵細胞中不轉(zhuǎn)錄。為研究B基因表達對卵細胞的影響,設(shè)計了如下實驗。
據(jù)圖回答:
(1)B基因在水稻卵細胞中不轉(zhuǎn)錄,推測其可能的原因是卵細胞中DD(單選)。
A.含B基因的染色體缺失
B.DNA聚合酶失活
C.B基因發(fā)生基因突變
D.B基因的啟動子無法啟動轉(zhuǎn)錄
(2)從水稻體細胞或精子精子中提取總RNA,構(gòu)建cDNAcDNA文庫,進而獲得B基因編碼蛋白的序列。將該序列與Luc基因(表達的熒光素酶能催化熒光素產(chǎn)生熒光)連接成融合基因(表達的蛋白質(zhì)能保留兩種蛋白質(zhì)各自的功能),然后構(gòu)建重組表達載體。
(3)在過程①、②轉(zhuǎn)化篩選時,過程②②中T-DNA整合到受體細胞染色體DNA上,過程①①在培養(yǎng)基中應(yīng)加入卡那霉素。
(4)獲得轉(zhuǎn)基因植株過程中,以下鑒定篩選方式正確的是BCDBCD(多選)。
A.將隨機斷裂的B基因片段制備成探針進行DNA分子雜交
B.以Luc基因為模板設(shè)計探針進行DNA分子雜交
C.以B基因編碼蛋白的序列為模板設(shè)計探針與從卵細胞提取的mRNA雜交
D.檢測加入熒光素的卵細胞中是否發(fā)出熒光
(5)從轉(zhuǎn)基因植株未成熟種子中分離出胚,觀察到細胞內(nèi)僅含一個染色體組,判定該胚是由未受精的卵細胞發(fā)育形成的,而一般情況下水稻卵細胞在未受精時不進行發(fā)育,由此表明B基因表達能使卵細胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚B基因表達能使卵細胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】D;精子;cDNA;②;①;BCD;B基因表達能使卵細胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚
【解答】
【點評】
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