花青苷可以決定蘋果果皮、果肉等顏色的鮮艷程度，研究人員欲研究BR對花青苷合成的影響及機制。
（1）BR（油菜素內酯）是一種天然植物激素，通過影響細胞基因的表達起到 調節(jié)調節(jié)作用。
（2）A2基因為花青苷合成相關基因，為探究BR與A2基因之間的關系，研究者使用BR處理了蘋果幼苗，檢測A2基因的表達水平結果如圖1，該結果表明 BR促進A2基因表達BR促進A2基因表達。
（3）有人提出A2蛋白和R1蛋白會影響花青苷合成酶ANS基因啟動子的活性。研究者通過檢測熒光素酶的表達量來驗證此推測，進行了相關研究。
①構建表達載體：請將選項的序號或字母填入圖2相應的方框中。
啟動子：
Ⅰ．A2基因啟動子
Ⅱ．R1基因啟動子
Ⅲ．ANS基因啟動子
Ⅳ．熒光素酶基因啟動子
Ⅴ．常規(guī)啟動子
基因：
A．A2基因
B．R1基因
C．ANS基因
D．熒光素酶基因
②導入受體細胞：構建好的表達載體通過 農桿菌轉化/基因槍法農桿菌轉化/基因槍法法導入蘋果愈傷組織。
③實驗結果檢測：實驗結果如圖3，結果表明 單獨的A2蛋白抑制ANS基因轉錄，A2和R1蛋白都存在時抑制ANS基因轉錄效果更強（單獨R1無顯著影響）單獨的A2蛋白抑制ANS基因轉錄，A2和R1蛋白都存在時抑制ANS基因轉錄效果更強（單獨R1無顯著影響）。
（4）雙分子熒光互補技術可研究細胞內蛋白質之間是否相互作用。將黃色熒光蛋白基因分為2段（片段1與片段2），分別與可特異性結合的兩種蛋白的基因融合構建表達載體，將兩種載體同時導入受體細胞，在515nm激發(fā)光下可發(fā)出黃色熒光。研究者推測A2蛋白和R1蛋白在細胞內形成復合物發(fā)揮作用，進行如圖4操作，請寫出可驗證此推測的實驗現(xiàn)象。
| 實驗過程 | 實驗現(xiàn)象 |
載體組成 |
出現(xiàn)黃色熒光 出現(xiàn)黃色熒光
|
|
沒有黃色熒光 沒有黃色熒光
|
BR促進A2基因表達，A2蛋白增多，與R1蛋白形成復合物，作用于ANS基因的啟動子，抑制其轉錄，抑制花青苷的合成
BR促進A2基因表達，A2蛋白增多，與R1蛋白形成復合物，作用于ANS基因的啟動子，抑制其轉錄，抑制花青苷的合成
。【考點】基因工程的操作過程綜合；其他植物激素的種類和作用．
【答案】調節(jié)；BR促進A2基因表達；農桿菌轉化/基因槍法；單獨的A2蛋白抑制ANS基因轉錄，A2和R1蛋白都存在時抑制ANS基因轉錄效果更強（單獨R1無顯著影響）；出現(xiàn)黃色熒光；沒有黃色熒光；BR促進A2基因表達，A2蛋白增多，與R1蛋白形成復合物，作用于ANS基因的啟動子，抑制其轉錄，抑制花青苷的合成
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：25引用：1難度：0.4
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
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