為了提高菊花抗凍能力,研究者從其他生物中克隆出抗凍基因C(圖1),擬將其與質粒(圖2)重組,再借助農桿菌導入菊花中。
回答下列問題:
(1)構建重組質粒時需要用到的工具酶為 限制性核酸內切酶和DNA連接酶(限制酶和DNA連接酶)限制性核酸內切酶和DNA連接酶(限制酶和DNA連接酶)。為使抗凍基因C在菊花細胞中高效表達,依據(jù)圖2需要把目的基因片段插入表達載體的 啟動子a啟動子a和 終止子a終止子a之間。
(2)若要使目的基因在受體細胞中表達,需要通過質粒作為載體而不能直接將目的基因導入受體細胞,原因是 目的基因無復制原點(目的基因無表達所需的啟動子等)目的基因無復制原點(目的基因無表達所需的啟動子等)(答出一點即可)。若想了解抗凍基因C是否整合到菊花染色體上,檢測方法是采用 DNA分子雜交DNA分子雜交技術。
(3)科研工作者可以利用 PCR技術PCR技術獲得更多的抗凍基因C,借助農桿菌將重組質粒導入菊花細胞,在該過程中需添加酚類物質,目的是 吸引農桿菌感染菊花細胞吸引農桿菌感染菊花細胞。
(4)若想獲得完整的轉基因植株。還需借助 植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)技術。假如獲得的轉基因植株(抗凍基因C已經(jīng)整合到菊花的基因組中)抗凍能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是 目的基因的轉錄或翻譯異常目的基因的轉錄或翻譯異常。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】限制性核酸內切酶和DNA連接酶(限制酶和DNA連接酶);啟動子a;終止子a;目的基因無復制原點(目的基因無表達所需的啟動子等);DNA分子雜交;PCR技術;吸引農桿菌感染菊花細胞;植物組織培養(yǎng);目的基因的轉錄或翻譯異常
【解答】
【點評】
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