閱讀下面的材料，完成（1）～（4）題。
轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品已經(jīng)越來越多地進入了人們的生活。2020年7月，兩種國產(chǎn)轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物獲得生物安全證書。這是近十年來第二批獲得生物安全證書的國產(chǎn)轉(zhuǎn)基因作物，一種是轉(zhuǎn)epsps和pat基因抗除草劑玉米（DBN9858），另一種是轉(zhuǎn)基因抗除草劑大豆。我國是農(nóng)業(yè)大國，對轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物的管理非常嚴格。根據(jù)我國法規(guī)，除需對國產(chǎn)轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物進行檢測外，進出境的所有農(nóng)產(chǎn)品均需進行轉(zhuǎn)基因成分的檢測。
對轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)品的檢測方法，目前主要有兩類：一類是以導入外源基因的特定DNA序列為檢測對象；另一類則是以外源基因表達的蛋白質(zhì)為檢測對象。通常被檢測的特定DNA序列包括兩類：一類是非目的基因序列，主要為載體上通常具有的各種組成元件；另一類被檢測的則是目的基因序列本身。
基因芯片技術是一種能有效地對轉(zhuǎn)基因作物進行檢測的新技術。以對DBN9858的檢測為例，第一步，針對待測的特定DNA片段設計引物，擴增出的特定DNA片段帶上標記制成探針，經(jīng)變性后通過芯片點樣儀固定到雜交膜上，再經(jīng)過一定的處理，便得到可用于檢測的DNA芯片（如圖1）；第二步，從待測植物中提取DNA作為模板，加入引物進行擴增；第三步，將擴增產(chǎn)物經(jīng)過變性處理后鋪于芯片表面，放入雜交盒中，在適宜條件下進行雜交；第四步，待反應結(jié)束后，對芯片進行清洗等處理，用儀器檢測芯片上的雜交結(jié)果。利用基因芯片可以實現(xiàn)一次性高通量快速檢測，是一種具有良好發(fā)展前景的檢測手段。
（1）利用基因芯片可檢測特定DNA序列依據(jù)的是 堿基互補配對堿基互補配對原則。對DBN9858進行檢測的基因芯片的陣列設計為：第1列為空白對照，第2列固定玉米植株的內(nèi)源基因作為陽性對照，第3列固定與玉米DNA序列高度 非同源非同源（填“同源”或“非同源”）的DNA片段作為陰性對照，第4～6列可分別固定 epsps基因epsps基因、pat基因pat基因、啟動子（或終止子、標記基因）啟動子（或終止子、標記基因）進行檢測，每列重復多次以保證結(jié)果的準確性。
（2）制備探針可采用缺口平移法（如圖2），即先利用DNA酶使DNA分子上產(chǎn)生 單鏈單鏈（填“單鏈”或“雙鏈”）缺口，再利用DNA聚合酶具有的核酸外切酶活性和聚合酶活性，在缺口處的5'末端每切除一個脫氧核苷酸，同時在3'末端添加一個 帶標記帶標記的脫氧核苷酸，最終制成所需探針。
（3）若該基因芯片檢測有效，轉(zhuǎn)基因玉米DBN9858的樣本在芯片的第 24562456列上均應出現(xiàn)檢測信號，非轉(zhuǎn)基因玉米則應在第 22列上出現(xiàn)檢測信號。若該基因芯片準備商品化，你認為還應該在哪些方面進一步改進？（至少一點）
（4）除了基因檢測，還可以采用 抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交方法檢測農(nóng)產(chǎn)品中的蛋白質(zhì)．對轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品進行檢測時，常常會出現(xiàn)假陽性或假陰性的結(jié)果，下列分析合理的是 ACDACD（多選）。
A．某些檢測成分在植物中天然存在，導致檢測出現(xiàn)假陽性結(jié)果
B．PCR引物設計復雜，若引物間發(fā)生結(jié)合，會出現(xiàn)假陽性結(jié)果
C．轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品中外源基因表達產(chǎn)物在細胞中被加工、修飾，難以檢測，出現(xiàn)假陰性結(jié)果
D．轉(zhuǎn)基因作物中的外源成分含量低、在加工過程中易變性，導致出現(xiàn)假陰性結(jié)果
【答案】堿基互補配對；非同源；epsps基因；pat基因；啟動子（或終止子、標記基因）；單鏈；帶標記；2456；2；抗原-抗體雜交；ACD
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：41引用：2難度：0.6
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1．人類基因組計劃測定了人體的24條染色體，這24條染色體是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 0:30:1組卷：112引用：7難度：0.7 -
2．學習以下材料，回答（1）～（4）題。
利用抑制性tRNA進行無義突變遺傳病的治療
無義突變是由于某個堿基的改變使代表某種氨基酸的密碼子突變?yōu)榻K止密碼子（UAA、UAG或UGA），從而使肽鏈合成提前終止，造成蛋白質(zhì)的功能改變，引發(fā)相關疾病。約有10%～15%的人類基因相關遺傳疾病是由無義突變引發(fā)的。常規(guī)的基因治療是將正常基因的cDNA序列或是有治療價值的基因（如CRISPR-Cas9相關的基因編輯工具）通過一定的方式導入人體靶細胞內(nèi)，達到替代或修復缺陷基因、治療疾病的目的。導入基因插入位置不當、過高或過低表達，都可能會導致副作用。盡管基因編輯可以實現(xiàn)生理水平的基因表達，但基因編輯工具引入外源蛋白可能引發(fā)強烈的免疫反應仍然是巨大的挑戰(zhàn)。
抑制性tRNA（sup-tRNA）由天然tRNA改造而來，它的反密碼子通過堿基配對原則可以識別無義突變的終止密碼子，使得mRNA在翻譯至無義突變位點時不啟動翻譯終止而是繼續(xù)向后進行翻譯，獲得有功能的全長蛋白。
I型黏多糖貯積癥的病因，是相關基因發(fā)生無義突變，產(chǎn)生終止密碼子UAG。研究者構(gòu)建小鼠該突變基因mldua和Flag基因融合的載體（圖1），以及針對該無義突變設計的sup-tRNA表達載體（產(chǎn)生的sup-tRNA能夠識別UAG并攜帶酪氨酸Tyr,簡寫作sup-tRNATyr），將其導入細胞進行研究，發(fā)現(xiàn)與具有相似作用的化合物G418比較，sup--tRNA的作用更加顯著（圖2）；進一步利用重組腺相關病毒作為載體將sup-tRNA導入患病小鼠模型中，實驗顯示能夠降低黏多糖過度積存，實現(xiàn)對該病癥的有效治療，其療效可以持續(xù)半年以上。
從整體來看，G418在促進跨越無義突變位點繼續(xù)翻譯時引入的氨基酸較為隨機，而sup-tRNA引入的氨基酸較為單一，且不會影響內(nèi)源tRNA穩(wěn)態(tài)，所以sup-tRNA在個體治療中具有很高的安全性，因而在未來基因突變引起的疾病相關治療中具有非常大的應用前景。
（1）侵染時，作為載體的重組腺相關病毒與靶細胞膜上的發(fā)生識別，引發(fā)內(nèi)吞，進入細胞后釋放單鏈DNA作為模板，利用宿主細胞的催化合成其互補DNA鏈，再經(jīng)過過程產(chǎn)生sup-tRNA。
（2）除了引入的氨基酸較為單一，不影響內(nèi)源tRNA穩(wěn)態(tài)，我們還可推斷，用于治療的sup-tRNA在正常終止密碼子處（填“能”或“不能”）繼續(xù)往后翻譯，具有很高的安全性。
（3）研究者構(gòu)建mldua突變基因和Flag基因融合的載體，目的是通過檢測來確定是否跨越無義突變位點繼續(xù)向后翻譯。實驗結(jié)果表明，相比于化合物G418，sup-tRNA在促進無義突變位點的翻譯方面更加有效，支持這一結(jié)論的依據(jù)是：。
（4）有文獻報道，已在近1000個不同的人類基因中發(fā)現(xiàn)了7500多個無義突變。常規(guī)的基因治療需要為每種疾病設計獨特的治療策略，這將是一項耗費驚人的項目。據(jù)此說明sup-tRNA的應用價值。發(fā)布：2025/1/3 8:0:1組卷：27引用：1難度：0.6 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，自然界有些植物能產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶催化幾丁質(zhì)水解從而抵抗真菌感染。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入沒有抗性的植物體內(nèi)，可增強其抗真菌的能力。如圖表示為獲取幾丁質(zhì)酶基因而建立cDNA文庫的過程。
（1）圖示以mRNA為材料通過法獲得cDNA，該方法依據(jù)的原理是，通過這種方法獲得的基因中因缺乏和結(jié)構(gòu)，導致將其直接導入受體細胞中不能復制和表達。
（2）與選用老葉相比，選用嫩葉更容易提取到mRNA，原因是，且提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（3）將從cDNA文庫中獲得的幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體用酶和DNA連接處理后連接起來，構(gòu)建基因表達載體，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：5引用：1難度：0.7