牛的雄性胚胎中存在特異性的H-Y抗原，可在牛早期胚胎培養(yǎng)液中添加H-Y單克隆抗體，篩選胚胎進(jìn)行移植，以利用乳腺生物反應(yīng)器進(jìn)行生物制藥。為研制H-Y單克隆抗體，某同學(xué)以小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料設(shè)計(jì)了如圖實(shí)驗(yàn)流程。請回答有關(guān)問題：

（1）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物通過分泌的乳汁來生產(chǎn)所需要的藥品，稱為乳腺生物反應(yīng)器。將藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的

啟動(dòng)子

啟動(dòng)子

等調(diào)控組件重組在一起，通過

顯微注射

顯微注射

的方法，導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的

受精卵

受精卵

中，然后使其生長發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。
（2）上述實(shí)驗(yàn)前必須給小鼠甲注射H-Y抗原，該處理的目的是

誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌H-Y抗體的B淋巴細(xì)胞

誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌H-Y抗體的B淋巴細(xì)胞

。
（3）實(shí)踐中常用

聚乙二醇

聚乙二醇

作為促融劑，以提高細(xì)胞融合的成功率。
（4）寫出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要實(shí)驗(yàn)步驟：

取小鼠甲脾臟剪碎，用胰蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞，加入培養(yǎng)液制成單細(xì)胞懸液

取小鼠甲脾臟剪碎，用胰蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞，加入培養(yǎng)液制成單細(xì)胞懸液

。
（5）研究發(fā)現(xiàn)，在小鼠細(xì)胞內(nèi)DNA的合成有兩條途徑，主要途徑（簡稱D途徑）是在細(xì)胞內(nèi)由氨基酸和其他小分子化合物合成核苷酸，進(jìn)而合成DNA的過程，該過程中葉酸必不可少，氨基蝶呤是葉酸的拮抗劑，可以阻斷此途徑；另一輔助途徑（簡稱S途徑）是在次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下，經(jīng)酶的催化作用合成DNA，骨髓瘤細(xì)胞缺乏催化次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷合成的酶。
①圖中篩選1利用DNA合成途徑不同的特點(diǎn)配制的HAT培養(yǎng)基含有多種成分，其中添加的

氨基蝶呤

氨基蝶呤

具有篩選雜交瘤細(xì)胞的作用。骨髓瘤細(xì)胞及其互相融合細(xì)胞不能在HAT培養(yǎng)基上增殖，其原因是

缺乏催化次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷合成核苷酸的酶

缺乏催化次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷合成核苷酸的酶

。
②圖中篩選2含多次篩選，篩選所依據(jù)的基本原理是

抗體與抗原特異性結(jié)合

抗體與抗原特異性結(jié)合

，篩選的目的是

獲得能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細(xì)

獲得能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細(xì)

。
（6）通常選用囊胚期的早期胚胎做雌雄鑒別，鑒別后的

雌性

雌性

胚胎符合要求，可做胚胎移植。